脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群的变化

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1、分类号R392密级学校代码10367UDC577．109编号学号20105231007学位论文脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群的变化Changesoflocalinfiltratedmacrophagesubsetsintheinjuredspinalcordofrats论文类别：学术研究型作者姓名朱海指导教师姓名吕合作申请学位级别学位授予单位蚌埠医学院硕士学科专业免疫学研究方向细胞免疫论文答辩时间2013年5月学位授予日期2013年6月答辩委员会主席：论文评阅人：2013年5月28日硕士学位论文脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群的论文题目:变化Changesoflocalinfil

2、tratedmacrophagesubsetsintheinjuredspinalcordofrats研究生姓名:朱海指导教师:吕合作教授学科专业:免疫学研究方向:细胞免疫论文工作时间:2011年7月至2013年3月2013年5月24日学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文是本人在导师指导下独立进行实验研究工作所取得的成果，本论文中不包含其他人已经发表或已经获取得的研究成果。在本论文撰写中所引用其他研究者的研究内容和成果时已在论文中给予特别标注和明确说明。对本论文的实验研究以及论文撰写过程中给予帮助和建议等贡献的其他人士，也已作了致谢说明。本人完全理解本声明的法律责任，以

3、及所涉及的结果将由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日关于学位论文著作权的共享声明根据《中华人民共和国著作权法》和《高等院校知识产权管理条例》，本学位论目：SD大鼠脊髓损伤前后外周血和损伤局部T淋巴细胞亚群的变化是研究生在导师指导下完成的职务作品，得到蚌埠医学院相关部门科室的物质技术和经费支持，因此，本学位论文的著作权由研究生，导师和蚌埠医学院三方共同享有，均享有署名权和使用权等权益；本学位论文成果归属蚌埠医学院。根据国家学位授予条例，学校对本学位论文有使用权，包括保存本学位论文；因教学和科研的目的，保留在图书馆被查阅或借阅；学校可根据国家规定将本学位论文送交国家有部门保留和使用。

4、学校在公布本学位论文的全部或部分内容时，应保障研究生和导师的署名权等权益。研究生和导师在公开发表本学位论文的全部或部分内容时必须保障学校的署名权等权益，即在发表论文时及相关部门科室应署名为作者单位。声明人完全理解本声明的法律责任。研究生签名：导师签名：日期：年月日目录1．中文摘要……………………………………………………………………22．英文摘要……………………………………………………………………43．论文正文前言…………………………………………………………………………6材料与方法…………………………………………………………………14结果…………………………………………………………………

5、………35讨论…………………………………………………………………………404．结论…………………………………………………………………………415．参考文献……………………………………………………………………446．致谢…………………………………………………………………………457．附录附录A英中文术语缩略语对照表…………………………………………46附录B常用试剂配制……………………………………………………47附录C个人简历及发表论文……………………………………………48附录D综述………………………………………………………………55脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群的变化中文摘要研究背景

6、：目前，脊髓损伤的生理、病理的变化规律，依然没有清楚的阐述。最近研究表明，巨噬细胞在脊髓损伤后的一系列变化中处于重要的位置，了解好巨噬细胞及其亚型的变化更有利于深入了解脊髓损伤的免疫机制。目的：了解脊髓损伤大鼠损伤局部免疫微环境中巨噬细胞不同亚群的变化规律。方法：1.用纽约大学脊髓撞击仪，SD大鼠制备轻、中、重三种程度撞击损伤的脊髓损伤动物模型。2.依据开放场地实验（Openfieldtest，BBB）评估表对手术前和脊髓损伤后SD大鼠进行行为学评估并评定脊髓损伤效果。3.使用CD68FITC，CD86(B7-2)PE，CD163AlexaFluor®647三种抗体，采用流式细胞术检测

7、SCI前后外周血的巨噬细胞亚型。4.用密度梯度离心方法分离新鲜脊髓局部浸润的，其后使用CD68FITC，CD86(B7-2)PE，CD163AlexaFluor®647三种抗体，采用流式细胞术检测SCI前后损伤局部的巨噬细胞亚型。5.使用CD68、CCR7、Arginase-1，采用免疫荧光技术来观察巨噬细胞亚型在SCI前后损伤局部的时空变化。结果：1.用纽约大学脊髓撞击仪10g×25mm中等程度撞击SD大鼠的T9脊髓致SD大鼠双下肢肌力活动丧