厚壳贻贝肠道细菌群落组成及肠道细菌对稚贝附着的作用研究.pdf

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1、学校代码：10264研究生学号：M150111226上海海洋大学硕士学位论文厚壳贻贝肠道细菌群落组成及肠道细菌对稚贝题目：附着的作用研究Thegutbacterialcommunitycompositionand英文题目：effectsofgutbacteriaontheplantigradesettlementofthemusselMytiluscoruscus专业：海洋科学研究方向：海洋贝类分子生物学姓名：杨娜指导教师：杨金龙教授二O一八年五月二十一日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得

2、的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导

3、教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学博/硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注杨云锋清华大学教授主席周树学复旦大学教授委员中国水产科学研究院来琦芳研究员委员东海水产研究所梁箫上海海洋大学讲师秘书答辩地点水产与生命学院A211答辩日期2018.5.20上海海洋大学硕士学位论文厚壳贻贝肠道细菌群落组成及肠道细菌对稚贝附着的作用研究摘要厚壳贻贝是我国沿海人工繁育的重要水产经济贝类，其营养和食用价值高。近年，厚壳贻贝的养殖业发展迅速，其养殖规模不断提高。然而，在养殖过程中，常会因为贻贝疾病的发生而造成巨大的经济损失。肠道是厚壳贻贝重要的消化吸收器官，不同肠道微生物结构和组成是

4、否影响厚壳贻贝的生长和发育尚未得知。因此，通过研究宿主与肠道微生物之间相互作用的分子机制及探究肠道细菌对厚壳贻贝稚贝附着的作用，可以间接提高水产动物的存活率，从而提高养殖业的产量和质量，对人工生态养殖技术方面具有重要的理论意义。主要包括以下内容：1.厚壳贻贝的肠道细菌对其稚贝附着的作用研究为探讨肠道细菌形成的微生物被膜对贝类附着的作用，通过从厚壳贻贝成体肠道中分离10株肠道细菌，调查了上述肠道细菌形成微生物被膜特性，并分析了微生物被膜密度、细菌种属与厚壳贻贝稚贝附着之间的相互关系。所有肠道细菌均可有效促进稚贝附着。其中，Paracoccussp.1微生物被膜诱导的稚贝附着率最高（61%）；

5、只有5株肠道细菌Roseovariussp.1、Winogradskyellasp.1、Tenacibaculumsp.4、Bacillussp.5和Nonlabenssp.1的被膜密度与附着显著相关（P<0.05）。系统发育分析发现肠道细菌诱导附着率与其种属无关。本研究表明源于厚壳贻贝成贝肠道细菌可以促进其稚贝的附着，说明肠道细菌对厚壳贻贝的附着过程具有一定的作用。本研究结果为深入探讨肠道细菌与厚壳贻贝相互作用和推动该种规模化养殖提供理论依据。2.肠道细菌形成的微生物被膜诱导稚贝附着的因素分析本文选取了在108cells/mL初始密度下，微生物被膜对稚贝诱导活性最高的菌株Paracocc

6、ussp.1和最低的菌株Bacillussp.5，并比较了这两株不同诱导活性的肠道细菌微生物被膜的生物学特性。首先利用激光扫描共聚焦显微镜和扫描电子显微镜观察微生物被膜的分布和形态，其次对微生物被膜上的胞外产物（多糖、蛋白、脂类等）进行染色分析。共聚焦结果发现Paracoccussp.1微生物被膜膜厚较I上海海洋大学硕士学位论文厚，细菌分布较密集。扫描电镜结果发现菌株Paracoccussp.1呈椭圆状，菌株Bacillussp.5呈长杆状，且细菌周围均分泌出了不同的胞外产物。而微生物被膜上胞外多糖和胞外蛋白染色结果发现，这两株细菌分泌的胞外多糖量和胞外蛋白量均没有差异；但胞外脂类染色发现

7、高诱导活性菌株Paracoccussp.1分泌的脂类显著比诱导活性低的Bacillussp.5分泌的多，推测微生物被膜上的胞外脂类可能在诱导稚贝附着的过程中起到了关键作用。该调查结果为进一步研究厚壳贻贝稚贝附着的相关因素奠定了基础。3.上升的海水温度对厚壳贻贝肠道细菌群落组成的影响研究宿主相关的肠道微生物对宿主健康的免疫系统是关键的。在宿主的肠道中含有丰富的细菌群落，并且会受到外界环境因素（例如，温度）的显著影响。本研究