dna 序列多态性

《dna 序列多态性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、DNADNA序列多态性序列多态性张张霁霁内内容容¢序列多态性的基本概念序列多态性的基本概念¢序列多态性产生的机理序列多态性产生的机理¢几种序列多态分析技术及基本原理几种序列多态分析技术及基本原理¢序列多态在法医学中的意义序列多态在法医学中的意义总总论论¢什么是序列多态特定基因座上的碱基序列差异，是不同个体间本质的遗传差异。AGGCTTGCACTGAGTCTTAGGCCTGCACTAAGTCTT遗传亲子关系、个体识别遗传变异差异（突变）多态性（个体间差异）§§1DNA1DNA测序及多态分析测序及多态分析¢什么是测序什么是测序对对D

2、NADNA分子分子一级结构一级结构的分析的分析--------ATCG的排列SangerSanger双脱氧核苷酸链终止法（双脱氧核苷酸链终止法（19771977））循环测序循环测序自动测序自动测序MaxamMaxam化学降解法（化学降解法（19771977））测序基本原理和技术测序基本原理和技术¢MaxamMaxam化学化学降解法降解法¢对特定碱基（或特定类型的碱基）进行化学修饰¢修饰碱基从糖环上脱落¢修饰碱基5’和3’的磷酸二酯链断裂ProteinProtein--DNADNASangerSangerBornAugust13t

3、h,1918inRendcombe,Gloucestershire.Hisfather(alsoFrederickSanger),wasamedicaldoctorwhoinspiredhissontopersuebiology.Ph.D.inbiochemistryduringthewaronlysinemetabolism.In1943,Sangerdevelopedamethodofsequencingaminoacids,anddeducedthecompletesequenceofinsulin.NobelPrizef

4、orChemistryin1958."forhisworkonthestructureofproteins,especiallythatofinsulin"In1962,hebecamefacinatedbynucleicacidsandusedearlierdevelopmentsasthefoundationoftheSangersequencingmethod.2ndNobelPrizeforChemistryin1980."Fortheircontributionsconcerningthedeterminationof

5、basesequencesinnucleicacids"测序基本原理和技术测序基本原理和技术¢双脱氧核苷酸双脱氧核苷酸链终止法链终止法测序基本原理和技术测序基本原理和技术¢循环测序循环测序比比较较链终止法链终止法循环测序循环测序自动测序自动测序4个反应管4个反应管1个反应管同位素标记同位素标记荧光标记标记dNTP标记引物标记ddNTP55℃30minPCR循环PCR循环四道凝胶电泳四道凝胶电泳单道凝胶/毛细管电泳X光胶片X光胶片激光荧光检测人工读片人工读片计算机自动分析§§11等位基因特异性探针杂交技术等位基因特异性探针杂交技术

6、¢基本原理：基本原理：核酸分子杂交反应核酸分子杂交反应¢PCRPCR--ASOASO探针杂交探针杂交针对序列多态等位基因序列设计特异性探针针对序列多态等位基因序列设计特异性探针PCRPCR扩增各等位基因扩增各等位基因ASOASO探针与探针与PCRPCR产物杂交反应产物杂交反应洗去未结合洗去未结合//结合不牢固的非特异性探针结合不牢固的非特异性探针检测标记物是否存在检测标记物是否存在¢分类分类正向杂交正向杂交固定固定PCRPCR产物；标记探针产物；标记探针反向杂交反向杂交固定探针；标记固定探针；标记PCRPCR产物－－产物－－DN

7、ADNA芯芯片技术片技术PCRPCR--ASOASO--AA--GG--TT--AA--CC--CC--GG--TT--AA--TT--TT--CC--GG--AA--AA--CC--GG--TT--GG--CC--CC----AA--GG--TT--GG--CC--CC--GG--TT--AA--TT--TT--CC--GG--AA--AA--CC--GG--TT--GG--CC--CC----AA--GG--TT--AA--CC--CC--GG--TT--AA--TT--TT--CC--GG--AA--AA--CC--GG-

8、-TT--GG--CC--CC----AA--GG--TT--AA--CC--CC--GG--TT--AA--TT--TT--CC--GG--AA--AA--CC--GG--AA--GG--CC--CC--TheGenerationofaDotBlotforTy