龙须菜多糖的分离纯化、结构鉴定、生物活性及作用机制研究

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1、万方数据学校代码：研究生学号：10264D060201016上海海洋大学博士学位论文题龙须菜多糖的分离纯化、结构鉴定、生物活性及作用机制研究ThestudyOilpolysaccharidesfromred英文题目：∞翟黑善罴絮：裟吉黧笔=翟玛BioactivitiesandIt’sMechanism专业：水产品加工及贮藏工程研究方向：姓名：指导教师：天然活性物质研究宫春宇潘迎捷教授张劲松研究员唐庆九副研究员二OO九年四月三日万方数据论文答辩委员会人员名单lIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIY2722198姓名工作单位职称是否博士导

2、师备注黄为一南京农业大学教授是主席何培民卜-海海洋大学教授是委员施志仪．上海海洋大学教授是委员方积年中科院药物所研究员是委员丁侃中科院药物所研究员是’委员赵勇上海海洋大学副教授秘书答辩日期2009年6月14臼下午l时答辩地点食品学院A210学位评定分委员会意见：学位评定分委员会主席(签字)：年月日万方数据上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明并u'11用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的

3、内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：≥田年g月f午日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密曰学位论文作者签名：絮静指导教师签名：海够也H期：枷7r年占月／'fE

4、l日期：以年5月IP日万方数据上海海洋人学博士论文龙须莱多糖的分离纯化、结构鉴定、生物活性及作用机制研究摘要龙须菜(Gracilarialemaneiform&Weber-vanBoss)是江蓠属(Gracilaria)的一种温带性红藻，属红藻门(Rhodophta)、真红藻纲(Florideophyceae)、杉藻目(Gigarfinales)、江篱科(Gracilariales)。龙须菜分布于中国、日本等国，在我国原产于山东省沿海，近年来在广东、福建等省实现规模化养殖，产量逐年增加。其主要用途是作为琼胶生产的原料，鲍鱼饲料及绿色食品开发，也

5、可作为金属富集器。龙须菜的研究才刚刚起步，目前国外未见有关龙须菜生物活性方面的研究报道，国内也只有少数学者对龙须菜多糖的生物活性进行了初步研究，发现其具有抗突变、抗肿瘤、清除自由基和抗氧化作用，但有关龙须菜多糖提高免疫力和多糖纯化方面的报道甚少。本文对龙须菜粗多糖进行了分离纯化和化学结构研究，并重点研究了龙须菜多糖的免疫调节活性，同时探讨了体外抗氧化以及体外抗肿瘤活性，以期为龙须菜活性多糖的开发提供更广泛的理论和实验依据。1、龙须菜多糖的提取、分离及理化性质研究龙须菜多糖提取工艺研究表明，室温提取比高温提取多糖具有更好的刺激小鼠淋巴细胞增殖作用

6、，且提取率更高，因此本文选择室温作为龙须菜多糖提取温度，经L9(34)正交试验优化获得室温下龙须菜多糖提取最佳工艺，即料液比1：20，提取时间12h，提取次数3次，多糖得率为9．96％。通过比较一步脱硫酸基法和两步脱硫酸基法对龙须菜粗多糖硫酸基脱除效果发现，采用两步脱除方法可以得到较理想的硫酸基脱除效果和较好的多糖回收率，硫酸基脱除率最高达72．9％，多糖回收率达48．9％。采用超滤分级、DEAE一阴离子交换柱层析和凝胶柱层析等纯化方法对龙须菜多糖进行了系统的分离纯化。龙须菜室温提取粗多糖GCp经超滤分级获得GCpFl(1—10万)和GCpF2

7、(>10万)，经DEAE一阴离子交换柱层析GCpFl被分为5个组份(GCpFl．1、GCpFl—2、GCpFl—3、GCpFl．4和GCpFl—5)，GCpF2被分为4个组份(GCpF2—1、GCpF2—2、GCpF2．3和GCpF2—4)，进一步凝胶层析获得三种均一多糖，GCpFl．1B、GCpF2一iB和GCpF2：3B。紫外扫描显示GCpF2—1B和GCpF2．3B在280nnl和260niTl处没有吸收峰，表明两种均一多糖不含蛋白质和核酸，或含量极低。经HPLC测定GCpFl．1B、GCpF2．1B和GCpF2．3B的分子量分别为9．3

8、×104Da、1．10x105Da和1．03父10’Da。万方数据龙须菜多糖的分离纯化、结构鉴定、生物活性及作用机制研究2、多糖结构的研究通过单糖组成