基于抗原抗体反应的牛源a型多杀性巴氏杆菌保护性抗原的筛选及鉴定

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1、单位代码１０６３５学号１１２０１２３２８００１９５９各－硕士学位论文基于抗原抗体反应的牛源Ａ型多杀性巴氏杆菌保护性抗原的筛选及鉴定论文作者：李春明指导教师：彭远义教授，学科专业：微生物学研究方向：微生物代谢与调控提交论文日期：２０１５年４月１０日论文答辩日期：２０１５年５月３０日学位授予单位：西南大学中国？重庆２０１５年５月ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙ

2、ＳｃｒｅｅｉｎｇａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＡｎｔｉｇｅｎｓｆｒｏｍＢｏｖｉｎｅＰａｓｔｅｕｒｅｌｌａｍｕｌｔｏｃｉｄａｓｅｒｏｔｙｐｅＡ－ＲｅａｃｔｂａｓｅｄｏｎａｎｔｉｅｎａｎｔｉｂｏｄｉｏｎｇｙＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＬｉＣｈｕｎｍｉｎｇＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙ：Ｐｒｏｆ．ＰｅｎｇＹｕａｎｙｉＭａｏｒ；ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｊｇｙＦｉｅｌｄ：Ｍｉｃｒｏｂｉａｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｒｅｕｌａ

3、ｔｉｏｎｇＣｈｏｎｇｑｉｎｇＣｈｉｎａＭａｙ，２０１５独创性声明学位论文题目：基于抗原抗体反应的牛源Ａ型多杀性巴氏杆菌保护性抗原的條选及鉴定本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。／＾＞学位论文作者：签字曰期：７＾Ｊ年／＞／曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学

4、有关保留、使用学位论文的规，定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院筹）可以将学位论（文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存。、汇编学位论文保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：ｄ不保密，□（保密期限至年月止。）学位论文作者签名：；导师签名：签字日期：卞年＜月／＞日签字曰期：年月／ｔ日／目录Ｉ艘ＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ第１章文献综述

5、１１１１．巴氏杆菌病的病原学１．１．１多杀性巴氏杆菌的概述１．１１．１２多杀性巴氏杆菌的病原特征？２１．１．３多杀性巴氏杆菌的血清型１．２多杀性巴氏杆菌病流行现状２．２１３多杀性巴氏杆菌病诊断与检测方法１４３．多杀性巴氏杆菌病的防治１．５多杀性巴氏杆菌致病性及保护性抗原研究３１５．１ＩＶ４．型菌毛和粘附素１．５．２荚膜４１．５．３脂多糖５１．５．４外膜蛋白５．６１５．５多杀性巴氏杆菌毒素１．５．６其他毒力因子

6、６１．６蹄选疫苗革Ｅ基因的方法７１．６．１７基因组学技术１６２７．．蛋白质组学技术１．６芯片技术８．３生物第２章引言９２．１研究目的与意义９２２９．研究内容２．２．１牛源多杀性巴氏杆菌保护性抗原候选基因的初步蹄选及克隆表达．．．９．２ＥＬＩＳＡ１０２．２牛源巴氏杆菌保护性抗原候选分子的间接方法蹄选．２１０２．３部分保护性抗原候选分子对小鼠的免疫保护性研究２．３技术路线１０３１１第章牛源多杀性巴氏杆菌保护性抗原的初步蹄选及克

7、隆表达３．１１１測３．．１１菌株与培养基１１３．１．２试剂盒１１３．１．３主要试剂１１３．４．１主要仪器及设备１１３．１．５主要试剂的配置１２３．２方法１３３．２．１牛源Ａ型多杀性巴氏杆菌候选基因的克隆１３３．２．２牛源Ａ型多杀性巴氏杆菌候选基因重组载体的构建１４３．２．３牛源Ａ型多杀性巴氏杆菌候选基因的表达１８３１９．３结果３１．３．１生物信息学分析结果９３．．３２特异性引物设计结果２０３．３．３目的基因ＰＣＲ结

8、果２３３．３．４目的蛋白的诱导表达２５３．４讨论２７３．４．１基于基因组学技术的初步蹄选２７３．４．２引物的设计注意事项２７３．４．３载体的选择与构建２８３．４．４大肠杆菌表达系统诱导时间的优化２８第４章牛源巴氏杆菌保护性抗原候选分子的间接ＥＬＩＳＡ方法蹄选３１４１綱３１．４．１．１主要试剂３１４．１．２主要仪器和设备３１４．１．３主要试剂的配置３２４．２方法３３４．２．１不同血清型牛源多杀性巴氏杆菌抗血清的制备及效