抗a型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备

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3、胞工程ｔ名：侯本慕指导教师：雑棚—“李瑶副教授论文题目抗Ａ型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＹＡＧＡ－－ＩＮＳＴＴＹＰＥＡＦＯＯＴＡＮＤＭＯＵＴＨＤＩＳＥＡＳＥＶＩＲＵＳ研究生：侯本晶专业：动物学研究方向：动物细胞工程学院：生命科学学院指导教师：李煌教授李瑶副教授２０１５年４月１０日内聚古人学硕士毕业论文抗Ａ盟口蹄疫病毒单克隆抗体的制备原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导

4、师的指导下进行的研究工作及取得的研究成。，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果果除本文已经注明引用的内容外，也不包含为获得内蒙古大学及其他教育机构的学位或证书而使用过的材料－。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：指导教师签名：＇＾■ｂＪ期：７６、Ｌ＼日期：０］在学期间研究成果使用承诺书木学位论文作者完全了解学校存关保留、使用学位论文的规定，即：内蒙古人学有权将：７位论文的全部内界或部分保留并向国家有关机构、部门送交位论文的复印件和磁盘，允

5、、缩印或其他复制手段保存、？。许编入有关数据库进行检索，也可以采用影印丨：编学位论文为保护学院和导师的知识产权，作者在学期间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使用涉及在学期间主要研究内容或研究成果，须征得内蒙古大学就读期间导师的同意；若用于发表论文，版权单位必须署名为内蒙古大学方可投稿或公幵发表。学位论文作者签名：‘＾‘＾（曰期：ｉ（Ｘ．ｃ１日期：）２－内染古大学硕业论文抗Ａ把丨１丨：中蹄疫病毎单克降抗体的制各抗Ａ型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备摘要口蹄疫是口蹄疫病毒引发的一种人畜共患的烈性传

6、染病，对现在。口口的畜牧生产有巨大影响抗蹄疫单克隆抗体技术对蹄疫的检测，早期预防等有重要影响，对研究如何诊断、防治口蹄疫等有重要意义。本研究使用兽用Ａ型口蹄疫灭活疫苗做抗原，免疫健康ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，让其体内产生抗Ａ型口蹄疫病毒的抗体，通过ＰＥＧ诱导融合技术制备出针对Ａ型口蹄疫病毒的单克隆抗体细胞株，并针对杂交细胞和单克隆抗体的生物学特性进行鉴定。为之后研制开发应用型诊断产品打下基础。１、口蹄疫病毒单克隆抗体制备条件的探索在进行正式单克隆抗体制备前，分别对ＳＰ２／０细胞、词养细胞和脾细胞在完全培养基和选择培养

7、基中的生长特性进行了研究；对融合过程中使用的ＰＥＧ的分子量和浓度进行了优选；针对免疫过程中用到的兽用Ａ型口蹄疫灭活疫苗的免疫剂量进行优选。结果表明：１）分子量为４０００，浓度为５０％的ＰＥＧ的融合率最高；２）免疫注射０．ＩｍＬ。疫苗时，小鼠血清抗体效价最好２、抗Ａ型口蹄疫病毒的单克隆细胞株的制备，蹄选以及克隆化选取健康６－８周龄ＢＡＬＢｃ３／小鼠，每只小鼠经过次腹腔免疫后３５＾＝１１内蒙古大学硕士毕业论文抗Ａ．蹄疫病毒单克隆抗体的制备检测血清效价，在融合前３天，尾静脉加强免疫；在无菌条件下取出免疫脾细

8、胞，与ＳＰ２／０细胞融合，经ＨＡＴ条件培养基蹄选后，检测培养基上清效价，初步确定阳性克隆；将抗体阳性的细胞培养孔通过