地涌金莲组织培养中的褐化抑制研究

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1、分类号S682.31密级公开UDC学位论文地涌金莲组织培养中的褐化抑制研究AStudyonAnti-browningDuringTissueCultureofMusellalasiocarpa侯健华指导教师姓名李正红研究员申请学位级别硕士专业名称风景园林学研究方向园林植物遗传资源与利用论文提交日期2015年5月论文答辩日期2015年6月学位授予日期2015年7月答辩委员会主席评阅人北京·中国林业科学研究院学位论文地涌金莲组织培养中的褐化抑制研究学位论文作者侯健华指导教师姓名李正红研究员申请学位级别硕士专业名称风景园林学研究方向园林植物遗传资源与利用论文答

2、辩日期2015年6月中国·北京DissertationfortheDegreeAStudyonAnti-browningDuringTissueCultureofMusellalasiocarpaCandidate:HouJianhuaSupervisor:Prof.LiZhenghongAcademicDegreeAppliedfor:MasterSpeciality:LandscapeArchitectureDateofDefence:June,2015Degree-conferring-institution:ChineseAcademyofFor

3、estry独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得本研巧生培养单位或其它教育机构的学位或证书一而使用过的材料。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。；学位论文作者签名日期：月乏日＞４＾（ｙ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解中国巧业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定，中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部口或机构送交

4、论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可＾＾１将学位论文的全部或部分內容编入有关数据库进行检索。，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名＾年月曰Ｉ２＾／去年＾月２／曰如１參＾／＾学位论文作者毕业联系方式工作单位：联系电话：电子邮件：通讯地址、邮编：摘要地涌金莲为我国西南地区特有的单种属植物，其株形端庄、花序硕美，是具有广阔前景的珍贵野生花卉种质资源。地涌金莲组织培养中的褐化问题一直是其优良品种选育及

5、规模化生产的技术瓶颈。为解决这一问题，本文以原变种地涌金莲和变种红苞地涌金莲为供试材料，对地涌金莲组织培养的外植体消毒方式、植物生长调节剂种类及配比和不同抗褐化剂对愈伤组织褐化的影响进行了研究，对比了原变种和红苞变种组织培养中的差异，分析了地涌金莲组织培养过程中总酚含量和PPO活性的动态变化，对地涌金莲不同变种、不同部位的总酚含量和PPO活性进行了定量分析。主要研究结论如下：（1）地涌金莲组织培养中未经消毒的外植体其污染率为0，且褐化率和褐化指数均显著低于消毒后的外植体；6-BA在地涌金莲愈伤组织诱导中起主要作用，浓度为2mg·L-1、3mg·L-1时有

6、利于愈伤组织的诱导，能显著降低褐化指数；添加柠檬酸+抗坏血酸（VC）混合液、表面添加VC均对红苞变种褐化未起到明显抑制作用，姜汁和阿魏酸对抑制愈伤组织褐化有较好的效果，48.5mg·L-1的阿魏酸能显著降低愈伤组织的褐化，使愈伤组织分化率达17.9%，较对照的2.9%提高了15%。（2）地涌金莲愈伤组织在培养过程中其褐化指数呈上升趋势，培养30d时原变种和红苞变种愈伤组织褐化指数分别为3.1%和8.3%，培养180d后褐化指数分别升至71.7%和89.3%，在相同的时期，红苞变种愈伤组织的褐化指数均显著高于原变种。培养30d时原变种愈伤组织生长量为487

7、.3%，红苞变种愈伤组织生长量为244.0%，随着继代次数的增加，愈伤组织相对生长量逐渐降低，到180d时分别降至33.3%和10.7%，红苞变种愈伤组织的相对生长量显著低于原变种。红苞变种愈伤组织比原变种愈伤组织褐化更为严重，更难成功获得组培苗。（3）在地涌金莲愈伤组织诱导时期，PPO活性急剧升高，原变种PPO活性高于红苞变种，培养14d时二者PPO酶的比活力分别为3948.1、2037.2（0.01ᇞA·g-1·min-1）。在愈伤组织培养60d后，原变种愈伤组织PPO活性开始降低，至培养120d后PPO活性保持在1700~1900（0.01ᇞA·g

8、-1·min-1）左右，红苞变种愈伤组织PPO活性并不降低，一直保持在2200~