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1、牛GPAM基因遗传多态性分析及基因沉默对脂代谢的影响PolymorphismdetectionforGPAMgeneanditsgenesilencingeffectonlipidmetabolismincattle作者姓名：于海滨专业名称：动物遗传育种与繁殖指导教师：于仙忠教授学位类别：农学硕士答辩日期：2015年6月3日中文摘要牛GPAM基因遗传多态性分析及基因沉默对脂代谢的影响西门塔尔牛在世界各国都有饲养，其品种分为乳用、肉用、乳肉兼用等类型。中国的西门塔尔牛是我国从瑞士引进后经过几代的杂交改良，现已成为我国一种大型的乳肉兼用牛的优良
2、品种。线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)参与催化三酰基甘油和磷脂生物合成过程的第一步反应，从而对甘油三酯进行调控。GPAM能够促进动物机体甘油三酯的生成，并通过中心和外周调节作用，对哺乳动物能量消耗、脂肪沉积、胴体质量以及整体的代谢进行调控。为揭示GPAM基因外显子多态性与西门塔尔牛(草原型)胴体组成和肉质性状的相关性，本研究采用DNA池测序及PCR-RFLP的方法检测了245头34月龄中国西门塔牛群体该基因外显子中SNP位点的多态性，并与中国西门塔尔牛群体的胴体组成、肉质性状进行了相关性分析。结果表明：GPAM基因中基因型（CC、
3、TC）的E20-2823C>T表现出较高的净骨重、胴体产肉率、胴体胸深、前蹄重、后蹄重（单蹄）、皮重、生殖器脂肪重、肾脏脂肪重（p＜0.05）；E20-3386G>A基因型（AA和GA）表现出较高的净骨重、肉骨比、大理石花纹、肾脏脂肪重（p＜0.05）。本研究同时也通过脂质体介导牛GPAM基因的RNA干扰载体，沉默内源性GPAM基因在牛胎儿成纤维细胞及牛前体脂肪细胞中的表达，以期验证GPAM基因对脂代谢的影响。实验结果表明：抑制GPAM表达后显著降低牛前体脂肪细胞和牛胎儿成纤维细胞中的甘油三酯（TAG）含量，结果证明GPAM基因可能在调节动
4、物脂肪代谢中起关键作用。关键词：中国西门塔尔牛，GPAM基因，多态性，肉质性状，胴体性状，RNAi，甘油三酯IAbstractPolymorphismsdetectionofGPAMgeneandtheeffectofgenesilencingonlipidmetabolismincattleSimmentaloriginatedinSwitzerland,dividedintomilktype,bothmilkandmeattype.ChineseSimmentalimportedfromSwitzerland,whichhadbecom
5、ealargemeatandmilkcattleafterseveralgenerationsofhybridvarieties.Theproteinenzymefromthisgene,glycerol-3-phosphateacyltransferasemitochondrial(GPAM),catalyzesthefirstcommittedstepintriglyceride(TAG)andphospholipidbiosynthesis.GPAMactsbothcentrallyandperipherally,andregulat
6、esadiposity,energyexpenditure,bodyweight,milkproduction,andoverallmetabolism.Inthepresentstudy,inordertorevealthecorrelationbetweenGPAMgeneexoncompositionandmeatqualitytraitsandpolymorphismofSimmentalCattleCarcass,PCR-RFLPtechniquewasusedtoanalyzetheassociationoftwonovelsi
7、nglenucleotidepolymorphisms(SNPs)inthecodingregion(exon20th)ofglycerol-3-phosphateacyltransferase,animportantplayerindenovolipogenesis,withadipogenesistraitsandothereconomicaltraits(carcassandmeatqualitytraits)ofChineseSimmental-crosssteers.Statisticalanalysisof45indicator
8、s,revealedthattheC-bearinggenotypes(CCorTC)ofE20-2823C>Tshowedhigheromasumfatweight,genit
