细胞mirna抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒（prrsv）复制的相关研究

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1、'玲掛I;，•V;擊:论文编号」.t'W..—乂K忍：■囯农学院..‘」..二♦•<、’；...■■'、-'丨讓徽；■-_位论文，；：•，心：、•-.〜:、细雎miRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PIHEliSV)复餺的相矣研究c兔，工乂:乂StudyontheSuppressionofPorcineReprodactiveandRespiratorySyndromeVirusReplicationbyCelluarmIRNAs蠢-^-V-V：.博士研究生：李丽l指导教师:童光志申请学位类另ih农学傅壬、;卜•‘:业：预防兽医学.:卜翁:t•狗研费培:；：辱、、单々位：上寧兽禪•究

2、所4…V:」舊必:A吩…，:'八''•2灰5年5月、J'■■-：.：""V^7.Iv"；T.^：^：••••.痛:独创性声明本人声明所y交的论文是我个人在导师指导下进行的研究I:作及収得的研究成Ig我所知.除了义屮特别加以标注和致谢的地方外，论文屮小liAil他人Ll行.发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教f'y机构的学位成丨

3、_丨-:书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：夕年^>^

4、丨关于论文使用授权的声明本人Vi全了解屮W农业科学院有关保留、使用学位论文的规定.即：中W农、丨k/科

5、保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，町以采川影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院讨以川式/I-M、同媒休上发表、传播学位论文的全部或部分内容。中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目细胞miRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的相关研究兽医微生物论文作者李丽薇专业预防兽医学研究方向及其分子生物学指导教师童光志培养单位（研究所、中心）±^rnm姓名职称单位专业盲评评阅盲评人盲评Ma辩主席周继勇浙江大学微生物学秦爱建教授扬州大学预防兽医学孙建和教授上海交通大学预防兽医学答丁铲研究员上海兽医研究所预防兽医学辩李泽君研究员上海兽医研究

6、所预防兽医学委刘光清研究员上海兽医研究所预防兽医学员李国新研究员上海兽医研究所预防兽医学会议记录（秘书）顾惠明论文答辩时间地点2015年5月25日上海兽医研究所密级:论文编号:中国农业科学院学位论文细胞miRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）复制的相关研究StudyontheSuppressionofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirusReplicationbyCelluarmiRNAs博士研究生：李丽薇指导教师：童光志申请学位类别：农学博士专业：预防兽医学研究方向：兽医微生物及其分子生物学培养单位：上海兽医研究所研究生

7、院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationStudyontheSuppressionofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirusReplicationbyCelluarmiRNAsPh.DCandidate:LiweiLiSupervisor:Prof.GuangzhiTongMajor:PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty:VeterinaryMicrobiologyandMolecularBiology

8、May2015摘要猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）可引起母猪晚期流产和仔猪呼吸疾病等临床症状。由于该病的病原猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）具有较高的变异性，且可造成持续性感染和免疫抑制，因而疫苗免疫防控比较困难。近年来，越来越多的证据表明宿主细胞microRNA（miRNA）是机体先天性/获得性免疫以及宿主-病原体相互作用的复杂网络中不可或缺的调节因子。通过直接结合病毒RNA抑制基因表达或间接作用于某个细胞成分进而影响细胞内通路和调节先天性免疫应答，miRNA在抗病毒感染和复制方面也扮演了重要的角色。为筛选具有抑制PRRSV复制潜在功效的miRNA，我们合成了15条miRNA模拟物

9、，其序列在不同物种之间具有高度保守性，且已有相关文献表明它们在先天性免疫和/或抗病毒方面具有一定功效。本研究利用体外转染miRNA模拟物或阴性对照后再感染相同剂量病毒的方法鉴定具有抗PRRSV作用的miRNA，并从病毒学水平、基因组复制水平和蛋白翻译水平证明其抑制作用，并进一步发掘其发挥作用的机制。结果表明，15条候选miRNA中仅有miR-26a可以强烈抑制PRRSV的复制。体外过表达miR-26a对不同毒力、不同基因型的PRRSV毒株均有抑