氧压调控因子yap1对镰刀菌致病力和don毒素合成调控机制的研究

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1、专化换化巧女聲位论义氧压调控因子偽公^对嫌刀茜致病为和DON毒素合成调控机制的研究心..V■'.,,王埼;'廣席乂榮lllllllP—I—曰二0五年五月—IP,分类号密级UDC专业学位硕±学位论文氧压调控因子扔/;/对鎌刀菌致病力和DON毒素合成调控机制的研究王埼专业学位名称农业推广硕±指导教师丈良娟教授刘阳研究员论文答辩日期2〇広车S同W■日学位授予日期答辩委员会主席脚、解^广西大学学位论

2、文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文,是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果,论文不包含任何其他个。除已特别加W标注和致谢的地方外人或集体已经发表或撰写的研究成果,也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料一。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品,知识产权归属广西大学,即;学校有。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权权保存并向国家有关部口或机构送交学位

3、论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可W将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行、检索和传播,可W采用影印、缩印或其它复制手段保存汇编学位论文。本学位论文属于;□保密,在年解密后适用授权。□V不保密。""(请在W上相应方框内打V)论文作者签名:王讀日期:1015年{目^日指导教师签名:日期;如^/J^作者联系电话:电子邮箱;1氧压调控因子向0/对編刀菌致病力和DON毒素合成调控机制的研究摘要小麦是我国种植面积和产量仅次于水稻

4、的粮食作物。小麦赤霉病给小麦产量造成巨大损失,严重影响小麦的品质。鎌刀菌是引起小麦赤霉病的首要菌种,该病菌能够产生脱氧雪腐鎌刀菌帰醇DeoxnivalenolDON毒素,(y,)一而这种毒素会严重威胁食品安全。DON毒素是个非常重要的致病因子,是一种产生于禾谷鎌刀菌、兰线嫌抱菌、尖抱嫌抱菌等丝状真菌的次级代谢产物,在多种谷物(小麦,玉米,大麦,燕麦和黑麦)及其制品中广泛存在。DON的产生能够影响病菌的侵染过程。同时光、H、碳源、氮源、氧p化压力等这些环境因素,{^及位于毒素合

5、成基因簇^外的基因都可能影响跟毒素相关基因的表达或者能够调控相关毒素的生物合成。在病菌侵染植物过程中,植物对病菌侵染最初的防御反应就是植株体内活性氧(ROS)的积累,赤霉病菌中民OS胁迫相应系统的存在对于赤霉病菌的侵染与毒素产生都有十分重要的意义。本研究首先通过同源重组的方法对巧P/基因进行基因敲除,对获得的突变体进行验证,然后研究敲除突变株与野生菌株相比的表型变化,包括生长速率,产抱量,产毒量,菌丝形态,对外界氧化剂的反应,与产毒相I关基因的表法情况。着重分析氧压

6、调控因子扣pi基因的生物学功能。通过本实验的研究,得到如下结论:K对鎌刀菌的产抱有调控作用,防P7的缺失会使得产抱量有小幅度上升。一2、历少/对镶刀茜的菌丝表面生长形态有定影响,在缺失扔P7之后,无论在正常条件下培养还是在氧压条件下,,菌丝表面与野生型相比均有糟皱。3、缺失突变体的产毒量比野生型要低,说明仿pi与产毒基因相互作用,调控禾谷鎌刀菌的产毒。4、通过叶片侵染实验7对禾谷嫌刀菌的致病力并无明显影响。,得出y如?5、通过实时巧光定量PC民分析,趴基因(

7、7H4、7W6、7W/0、、7W57H和衍P7的表达量不难发现,与野生型相比,敲除型的yap7基因基本不表达。而与产毒相关的基因7>/4、7W5、7W6、7W70均为低表达,h。与产毒直接相关的7HW7基因在4时却相对高表达,但后又趋于降化通过查阅W前文献,7W6、7hW0为转录因子,能够调节7W7W发挥作用,但是在扣P;敲除么后,7H基因簇上的呪4、7W_5、7H6、JWW、7W基因如何调控产毒一,需要后续实验进步研究。’关键词1:鎌刀菌氧化压力DON7

8、>IITheOxidativeStressReulatinFactor拓7MediatesVirulenceandggpDeoxnivalenolBiosnthesisinFusariumyyAbstractWheatisthefoodcropwhichisonlsecondtodoein出ePlantAreaandyrodudioninourcountr.W

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