甜菜高效组培再生体系建立及遗传转化研究

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1、分类号Ｓ３３２．３学校代码１０１２９Ｉ：０Ｃ６３３．６学号２０１２２０２０２９硕±学位论文甜菓高效组培再生体系建立及遗传转化硏究ＴｈｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＥ巧ａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＥｆｆｉｃｉｅｎｔＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎＲｅｅｎｅｒａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍｏｆＳｕａｒＢｅｅｔａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｇｇ■口；．：．申请人乎斯乐＼学科口类：农学。学科专业：作物遗传育种ｒ躬■．－？、、．‘立？硏究方向：

2、作物种质资源创新■非；指导教师：白晨研究员．ｎ；、．．—论女提交日期：二〇五年六月内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包一括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何寅献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。一申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担切相关责任。论文

3、作者签名；巧乐日期；＞１Ｌ＾％内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，目Ｐ；研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电。子文档，允许论文被查阅和借阅学校可公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），采用影印、缩印或其他手段保存论文。论

4、文作者签名：场指导教师签名：曰期：１卢仁ｆｔ乂摘要甜菜化一二ｔａ〇是世界上重要的糖料作物之，也是我国第大糖料作物２－３，在北方农业生产中占有重要地位。近年随着甜菓机械化种植模式的推进，甜菜生产中病虫草害日渐凸显。实践证明，转基因是解决作物草害和虫害的最有效手段，因此，开展甜菜转基因生物技术研巧势，针对甜菜生产上主要虫害及杂草为防治对象在必行，也是甜菜产业长远发展的需求。目前，植物基因工程的遗传转化技术己基本一成形直未见报道，，但甜菜转基因品种的产业化生产甜菜转基因品种未能产业化应

5、用是由多种原因造成的一，其中甜菜很难建立起高效的遗传转化再生体系和未能找到个合适的离效的选传转化方法就是其中重要的两个原因，本研巧通过对５种不同基因型甜菜的多种外植体进行再生培养，研究分析影响甜菜外植体再生的因素，建立并优化了甜菜植株再生体系对己构建Ｂｔ基因ｃｒｌＡｃ甜菜表达载体ｐＳ陆ｔ：ｙ进行了酶切鉴定，并通过农杆菌介导法对甜菜进行了遗传转化；研究了农奸菌介导甜菜的不同转化条件，建立甜菜转基因体系为今后甜菜转基因品种的产业化生产奠定基础。，主要研究结果如下；１、本研究利用３０４０７、３０４２

6、７、３２４４９、３５２５０、４４３２１五种基因型不同的甜菜品系为材料，通过对五种材料外植体分化再生的组织培养分析研巧，筛选出高诱导率基因型材科１份（３５２５０）；Ｗ３５２５０作为材料，筛选出适用于此品系的最适诱导分化’＋ｍ＋Ｌ６－筛选培养基１种：ＭＳ０．５Ｌ＼ＡＡＬ５ｍＢＡ１Ｓ＋０．５ｍＬｇ／ｇ／；继代培养基种Ｍｇ／＋－Ｓ＋ＯｍＭＮＭ１．Ｏｍ／Ｌ６ＢＡ生根培养基１种Ｍ１．。ｇ；ｇ／ＬＮ２、酶切鉴定含Ｂｔ基因ｃｒｙｌＡｃ的甜菜表达载体ｐＳ陆ｔ，证明了该载体的正确性。

7、，优化了农杆菌侵染甜菜的最佳条件为采用农杆菌介导法对甜菜进行了遗传转化：＝－２５ｍ一０００．５０．７最适侵染时间ｉｎ经抗性筛选、诱导分化，得到，？？，：批抗性芽多２４次继代培养后，最终获得株抗性组培苗。３、利用ＰＣＲ护増技术检测抗性植株，检测出５株含Ｂｔ基因ｃｒｙｌＡｃ的阳性组培苗。关键词：甜菜；转基因；遗传转化；Ｂｔ基因Ｔｈｅ民ｅｓｅａｒｃｈｏｎＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＥｆｆｉｃｉｅｎｔＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎＲｅｅｎｅｒａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍｏｆＳｕａｒＢｅｅ

8、ｔａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｇｇＡｂｓｔｒａｃｔＳｕａｒｂｅｅｔｉｓｏｎｅｏｆｉｍｐｏｒｔａｎｔｓｕｇａｒｃｒｏｐｓｉｎｔｈｅｗｏｒｌｄｗｈｉｃｈｒｏｖｉｄｅｓａｒｏｘｉｍａｔｅｌｇ：ｐｐｐｙ－Ｔｏｎｅｏｆ：Ｏ打ｅｔｈｉｒ