用于轴突牵拉生长的背根神经节体外培养体系探究

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1、分类号学号M201272258学校代码10487密级硕士学位论文用于轴突牵拉生长的背根神经节体外培养体系探究学位申请人：汪圆圆学科专业：模式识别与智能系统指导老师：：何际平教授答辩日期：2015年5月24日AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceAstudyofculturingDorsalRootGangliaexplantsinvitroforaxonstretchgrownCandidate:Y

2、uanyuanWangMajor:PatternRecognitionandIntelligentSystemSupervisor:Prof.JipingHeHuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan430074Hubei,P.R.ChinaMay,2015独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研'究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已

3、在文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声朋的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：闕恩日期：7£7伐毛兮月Tfe学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密^(请在以上方框内打W”）学位论文作者签名：指导教师签名:Xk曰期f月

4、_日期:以7你办雄华中科技大学硕士学位论文摘要轴突牵拉的研究对基于神经组织工程的外周神经损伤修复和神经接口技术的研究有重要意义，然而没有针对轴突牵拉的体外培养体系。因此，本文探索了用于轴突牵拉生长的背根神经节体外培养体系。首先，论证以背根神经节轴突作为牵拉对象，以经生物活性修饰的Aclar膜作为基底的培养体系的可行性；然后，设计Aclar膜生物活性修饰实验，寻找修饰方法；最后，设计牵拉装置，将上述体系进行轴突牵拉实验验证。Aclar膜修饰实验：（1）提取新生SD大鼠背根神经节；（2）分别用PDL、PLL、Collagen-

5、I、LN、PDL与LN联合、PDL与Collagen-I联合,修饰Aclar膜；（3）将背根神经节分别接种到各组经修饰的Aclar膜上，设计对照实验。（4）观察并记录实验结果。轴突牵拉实验：（1）设计加工牵拉培养室和驱动装置；（2）将上述培养体系，植入牵拉培养室，进行背根神经节静态培养；（3）待轴突跨越牵拉膜后，开始牵拉培养；（4）观察并记录轴突牵拉结果。本文得到如下结果：Aclar膜修饰实验：（1）培养72小时后，PDL组轴突的生长分化情况最好，平均轴突长度：1191.34227.41μm,单位长度轴突末梢数：0.18

6、980.052个/微米，与PDL+Collagen-I组、PLL组、Collagen-I组、LN组的差异有统计学意义（P<0.05）（2）培养14天后，免疫荧光染色显示，PDL组有丰富的轴突和支撑细胞，PDL+LN组轴突脱离Aclar膜表面。轴突牵拉实验:牵拉71小时，轴突平均生长速度为0.866mm/h；牵拉164小时后，轴突生长6.124mm。文本得到如下结论：（1）采用PDL修饰的Aclar膜，更有利于该体系背根神经节轴突的生长分化；（2）以Aclar膜作为基底材料、PDL作为生物活性修饰材料的背根神经节体外培养体

7、系，可用于神经轴突牵拉生长的研究。关键词：外周神经接口；轴突牵拉生长；背根神经节；含氟聚合物薄膜；修饰；I华中科技大学硕士学位论文AbstractTheresearchofaxonstretchgrownhasimportantsignificanceforthestudyofperipheralnerveinjuryrepairandneuralinterfacetechnologywhicharebasedonnervetissueengineering,butthereisnoinvitroculturesystem

8、fortheaxonstretchgrown.Therefore,asystemofculturingDorsalRootGangliaexplantsinvitroforaxonstretchgrownhasbeenstudiedinthisthesis.Firstly,theevidencesfor