马齿苋黄酮提取及生物活性研究

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1、马齿苋黄酮提取及生物活性研究作者：刘华，李玉萍，周春丽黄婷，孙笑颜【摘要】目的研究马齿苋黄酮的抑制脂肪堆积和抗氧化能力。方法用前脂肪细胞模型及羟基自由基抗氧化模型测定马齿苋黄酮体外影响前脂肪细胞3T3-L1增殖及其清除羟自由基能力。结果高浓度马齿苋黄酮(>200μg/ml)极显著抑制前脂肪细胞3T3-L1增殖。当马齿苋黄酮浓度大于0.061mg/ml，随浓度增加，其清除羟自由基能力增强;浓度为0.119mg/ml时清除率达50%，相当于0.130mg/ml的维生素C溶液。结论马齿苋黄酮有较强体外清除羟自由基能力，高浓度(>1

2、00μg/ml)时具有显著抑制前脂肪细胞3T3-L1增殖的能力。【关键词】马齿苋黄酮;3T3-L1;增殖;清除羟自由基　Abstract：ObjectiveTostudytheantioxidantandfatinhibitoryabilityofPortulacaoleraceaL.Flavonoids.MethodsInhibitoryactivitytoPreadipocyteproliferationandantioxidantactivityofflavonoidsextractedfromportulacaoleraceaL

3、.weredetected.ResultsTheresultsshowedthatPortulacaoleraceaL.flavonoidsexertedsignificantinhibitoryactivityonpreadipocytes3T3-L1proliferationattheconcentrationhigherthan200μg/ml.Furthermore,itshowed8higherhydroxylradicalsscavengingcapabilitywiththeincreaseofconcentrationa

4、ttheconcentrationhigherthan0.061mg/mL,besides,showedthesamecapabilityofscavenginghalfofhydroxylradicalsattheconcentrationof0.119mg/mlcomparedwith0.13mg/mlVitaminC.ConclusionPortulacaoleraceaL.FlavonoidshasstrongOH.Scavengingabilityandcansignifigantlyinbibit3T3-L1prolifer

5、ationathighconcentration(>100μg/ml).　　Keywords：PortulacaoleraceaL.Flavonoids;3T3-L1;Proliferation;Scavenginghydroxylradicals　　马齿苋portulacaoleraceaL.又名瓜子菜，为马齿苋科马齿苋属植物，我国从南到北均有生长，其资源极为丰富。近年来国内外学者发现马齿苋具有多种药理作用[1]，如抗菌抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗心血管疾病，增强免疫力等。马齿苋黄酮是马齿苋中生理活性成分之一，目前关于马齿苋黄酮功

6、效的研究尚少。本文通过3T3-L1细胞模型及抗氧化试验考察马齿苋黄酮体外抑脂及清除羟自由基能力，为进一步开发马齿苋活性成分提供理论基础。　　1材料与仪器8　　1.1材料新鲜马齿苋PortulacaoleraceaL.于2007-09购于南昌市农贸市场，经本校药学院药理学教研室鉴定。用清水洗净沥干，60℃干燥，粉碎成末备用。细胞株：3T3-L1细胞购自北京协和医院。高糖DMEM培养液，购自GIBICO;胎牛血清，购自杭州四季青;L-谷氨酰胺，HEPES，胰蛋白酶，MTT(溴化二甲噻唑二苯四氮唑)，DMSO(二甲基亚砜)均购自AMERESC

7、O;其它试剂均为国产分析纯(国药集团)。　　1.2仪器倒置荧光显微镜(IX-71：日本OLYMPUS);二氧化碳培养箱(ThermoFormaSeries-Ⅱ，美国Thermo);全自动酶标仪(MultiscanMk3，Labsystems)，紫外分光光度计UV2000(上海)。　　2方法　　2.1马齿苋黄酮的提取　　2.1.1黄酮提取参照周春丽等[2]的研究方法。　　2.1.2黄酮标准曲线采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法测定总黄酮，精确称取芦丁标准品8mg，至50ml量瓶中，加60%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得芦丁标准

8、溶液。用移液管准确吸取0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0ml的芦丁标准液分别置于10ml的容量瓶中，加入水2～4ml，加入5%亚硝酸钠0.38ml，摇匀，