原发性肝癌患者外周血GPC3mRNA的表达与微转移的关系柏凯

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1、原发性肝癌患者外周血GPC-3mRNA的表达与微转移的关系柏凯【摘要】目的探讨原发性肝细胞癌（HCC）患者外周血的Glypican-3（GPC-3）mRNA检测用于诊断HCC早期微转移的可行性。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测39例原发性肝细胞癌（HCC）、19例肝炎和肝硬化、10例转移性肝癌、10例肝血管瘤患者、19例健康献血员外周血GPC-3mRNA水平。结果HCC患者外周血中，GPC-3mRNA的检出率为62%（24/39），GPC-3mRNA的检出率与肿瘤直径77%（17/22）、癌结节数目67%（19/24）、临床TNM分期76%

2、（19/25）、门静脉癌栓90%（9/10）、远处转移100%（6/6）等临床参数密切相关。GPC-3mRNA在转移性肝癌、肝炎和肝硬化、肝血管瘤患者及健康献血员外周血中均未检出。结论巢式RT-PCR检测HCC患者外周血单核细胞GPC-3mRNA是一种早期发现原发性肝细胞癌血道播散的可靠而又敏感的实验方法。【关键词】肝细胞癌;GPC-3;巢式RT-PCR;微转移【Abstract】ObjectiveToexplorethefeasibilityofGlypican-3（GPC-3）mRNAasamarkerofmi-crometastasisinperipher

3、albloodofpatientswithhepatocellularcarcinoma（HCC）.MethodsSubjectsGPC-3mRNAinperipheralbloodweredetectedbynestedreversetranscriptionpolymerasechain8reaction（RT-PCR）in39patientswithHCC，19hepatitisBandlivercirrhosis，10themetastaticlivercancer，10hepatichemangioma，and19healthyvolunteers.R

4、esultsGPC-3mRNAwaspositiveintheperipheralbloodin24patientswithHCC（62%），andnegativeinpatientswithhepatitisandcirrhosis，hemangio-ma，metastaticlivercancerandhealthyvolunteers.TheexpressionofGPC-3mRNAwasstronglycorre-latedwithtumordiameter，portalthrombosis，metastasiaandTNMstage（P<0.05

5、）.ConclusionsNestedRT-PCRisasensitiveandreliablemethodfordetectingcirculatingHCCcells.【Keywords】HCC;GPC-3;nestedRT-PCR;micro-metastasis早期微转移是原发性肝癌（HCC）难以有效诊治和病死率高的主要原因之一，因此早期检测出外周血中的肿瘤细胞，对及早有效的综合治疗具有重要的临床意义。血液微转移是HCC的主要转移途径［1］，但血液微转移的诊断仍然存在困难，主要是没有找到能准确反映微转移的肿瘤分子标记物。近年来发现Glypican-3（G

6、PC-3）与肝癌的发生发展有密切的关系［2］。本研究对HCC患者的外周血进行巢式RT-PCR检测，探讨GPC-3mRNA检作者单位:400037重庆，第三军医大学新桥医院肝胆外科测对肝细胞癌微转移诊断的可行性。81材料与方法1.1研究对象2004年3月至2005年12月，第三军医大学新桥医院及西南医院诊治的HCC患者39例、肝炎和肝硬化19例、转移性肝癌患者10例、肝血管瘤患者10例、健康献血员19例。各类患者的诊断均经组织病理学或影像学检查证实，实验操作同期进行。39例HCC患者中，男性33例，女性6例，年龄30～72岁，平均（49±12）岁;其中TNM（国际

7、抗癌联盟第6版TNM分期标准）Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分别为5例（13%）、9例（23%）、19例（39%）、6例（15%）;伴门静脉癌栓10例（25%）;伴肝外转移6例（16%）;肿瘤直径≥5cm者22例（55%）;癌结节2个以上者24例（62%）;分化程度高、中、低者分别为6例（32%）、7例（36%）、6例（32%）;血清AFP≥31μg/L者25例（69%）。肝外转移灶的诊断依据X线、CT或彩色超声检查。转移性肝癌的原发灶分别是直肠癌（4例）、结肠癌（3例）、胃癌（2例）和胆管癌（1例）。其中4例经过组织病理学检查证实，其余6例根据影像学及其血清学检查确诊

8、。10例肝血管瘤诊断均经