食管脱落细胞DNA分析在食管鳞状细胞癌诊断中的价值

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1、浙江大学硕士学位论文食管脱落细胞DNA分析在食管鳞状细胞癌诊断中的价值姓名：陈献国申请学位级别：硕士专业：外科学（胸心外）指导教师：余国伟2003.3.1橱攫大学2003硕士学位论文食管脱落缨胞DNA分析在食管鳞状缨胞瘸诊断中的价值浙江大学医学院附鳎第一医院2000级硕士研究生导师中文摘要心胸多}科陈献圈余国伟f食管鳞状细胞癌怒公认的恶性程度最高韵肿瘤之一，尽管外科技术的不断进展，但预鹰仍不健，为了提高生存率，人们已探索蚤秘生物学指标来早期诊断。活检组织病理学检查是目前诊断此肿瘤公认的“金标准”，但在临床鲸选嚣营查等壤况下，由于截{莠较大，活捡帮经不垂确等原嚣，疆裁箕遂一步应用。DNA分析

2、是目前恶性肿瘤领域研究的热门课题，许多学者对多种恶佳瓣瘸组缓涨A懿交纯遂行了许多搽索。在燕鬻食警上凌缀熬中DNA辑有参数均较稳定，在恶变发生过程中，常易发生染色体畸变。对手术切除的标本，石蟮切片豹DNA分析报邋较多，大多数人认为食管鳞状纲胞癌发生后，组织缨胞DNA含量多有显著的变化。已有学者对胸水、腹水、尿液、胰渡等脱落细胞DNA分析进行了探索并运用于临床研究，怛食管脱落细胞DNAv‘分橱l丛协助诊麟食管鳞坟细臆痰的研究曩裁尚少见摄遂≯荧光擦针技零麴发／展使得流式细胞仪技术可直接用于检测肿瘤染色体的燮化，DNA含量发生微小夔交诧，羽褥麓提示瑟注释瘸豹发生，本醭究应震醭往嚣鼹染色对食管残浙江

3、大学2003硕士学位论文落细胞进行了流式细胞测定，具有直观、可靠、主观因素干扰少及适合大量标本检测等优点，目的在于用流式细胞技术探讨其在食管鳞状细胞癌中的诊断价值，为临床诊断、普查和复查食管鳞状细胞癌寻找一种新的有效、敏感的方法。方法研究对象为临床确诊41例食管鳞状细胞癌病人，中位年龄56岁，对照组为非食管鳞状细胞癌病人，中位年龄55岁。用食管拉网法获得食管脱落细胞，标本2份，1份送常规细胞学检查，1份行流式细胞仪测定。用机械分散法制成单细胞悬液，用碘化丙啶进行荧光染色，以Coulter公司流式细胞仪测定，记录和计算组方图，DNA指数，G2／GI，S期比率、细胞增殖活性指数等指标，同时结合

4、肿瘤的临床病理学特征，并与脱落细胞常规细胞学检查进行对比。两组间DNA倍体类型、流式细胞诊断阳性率和流式细胞分析与常规细胞学比较等计数资料，用X2检验，细胞增殖活性各参数比较用t检验。肿瘤分期和流式细胞结果比较用EXACTPRoBABITITIESIN2*2TABLE直接计算，其余计数资料用校正X2检验。结果一、DNA倍体组方图分析1．食管鳞状细胞癌组脱落细胞可表现为典型的非整数体峰，可见亚倍体和超倍体存在。2．典型的对照组仅见一二倍体峰。二、食管鳞状细胞癌和对照组的倍体类型分析1．DNA指数，食管鳞状细胞癌组DI为1．3l士O．23，对照组1．00：L0．03，比较浙江大学2003硕士学

5、位论文有显著差异(P<0001)2．DNA倍体类型异倍体(ANEUPLOD)出现率食管鳞状细胞癌组70．7％，对照组48％，比较有显著差异(P<0．001)3细胞增殖活性指标比较(1)G2／G1：食管鳞状细胞癌组2,071．+0．153，对照组1．996：t：0099，两组比较有显著差异(2)s期比率(SPF)：食管鳞状细胞癌组28．830士15997，对照组5．804．4-4．771，两组比较有显著差异(3)细胞增殖活性指数(PI)：食管鳞状细胞癌组37010士13794，对照组14738士9703，两组比较有显著差异。三、流式细胞肿瘤诊断的阳性率食管鳞状细胞癌组阳性率92．7％阴性率7

6、3％，对照组阳性率4．8％阴性率95．2％，两者相比有显著性差异(x2=46．00，P<0．001)。四、食管脱落细胞I)NA分析结果和食管鳞状细胞癌的临床病理特征关系】．食管鳞状细胞癌TNMI—11期脱落细胞DNA分析阳性率较ⅡI期有显著差异(P=0011)。2．食管旁淋巴结有转移和无转移两组食管脱落细胞DNA分析结果无显著差异(x2=01639，P>005)。3食管癌病程<3月和>3月分析，流式细胞诊断结果和病程无关(X2=00269，P>0．05)。五、食管脱落细胞流式细胞分析和常规细胞学检查比较流式细胞分析合计的阳性率为927％，而常规细胞学检查阳性率为75．6％，两者比较流式细胞

7、分析阳性率要高于常规细胞学检查(X2=3985，、／P<005)。?74浙江大学2003硕士学位论文结论1．食管鳞状细胞癌组食管脱落细胞的DI和An增高。2．食管脱落细胞的细胞增殖括性指标：G2／G1、$PF和PI，食管鳞状细胞癌组较对照组明显升高。3．对于食管鳞状细胞癌诊断，流式细胞法较常规脱落细胞学方法灵敏度更高。4．食管鳞状细胞癌TNM分期越晚，流式细胞仪检测食管脱落细胞DNA异常的检出率越高。5．在食管癌早期，用