狗舌草生物碱及抗肿瘤活性成分研究

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时间:2019-05-13

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1、摘要摘要狗舌草60%乙醇提取物具有抑制L121。细胞的作用,其中主要含有生物碱和黄酮类化合物。为了更好地评价狗舌草的药理活性和毒性并筛选出狗舌草的有效成分,本研究对狗舌草生物碱成分进行了的分析,对其总碱的LDs。进行了测定,并用分离得到的一个单体生物碱进行了抗肿瘤试验。1.狗舌草总生物碱的提取与氮氧化物的检测利用冷浸法和热回流法从狗舌草粉中提取出浸膏,浸膏用1%HCI酸化,过滤,得酸水液。酸水液用CH2C12萃取除杂质后,用25%氨水调pH至1011,得碱水液。碱水液用CH2CI2萃取,回收CH2CI2得总

2、生物碱。CH2CI2萃取后的碱水液分别用乙酸乙酷和正丁醇萃取。通过玩S0"-Zn还原反应和Ehrlich显色反应,检查狗舌草中是否含有生物碱氮氧化物。结果:通过冷浸法,狗舌草总碱提取率为0.067%;通过热回流法,总碱提取率为0.126%。狗舌草生物碱主要以游离型存在,氮氧化物很少或没有。2.的舌草总生物碱的TLC和GC-MS分析利用TLC和GC-MS对狗舌草生物碱成分进行初步分析。分析表明,狗舌草至少含有7个双稠毗咯睫生物碱(PAs),其中千里光宁(1)、千里光非灵(II)和全缘千里光碱(m)都是具有大环

3、双酷结构的PAso3.狗舌草总生物碱LD50yp'7定通过改良寇氏法、腹腔注射给药测定总生物碱对KM雌性小鼠的LDso。结果:狗舌草总生物碱LD5。值为74.52士6.08mgtkg(KM小鼠,ip),95%可信限为68.69-80.85mgtkgo4.狗舌草生物碱的分离、纯化与鉴定通过柱层析、制备性TLC及重结晶法,对狗舌草生物碱进行分离、纯化,通过MS,IR和NMR对分离到的单体化合物进行结构鉴定。结果:从狗舌草总碱中分离到2个生物碱(IV和VI),化合物IV被鉴定为当归酞天芥菜定,其水解物之一被分离、

4、鉴定为夭芥菜定(V)a5狗舌草总碱中非生物碱成分的分离与鉴定通过制备性TLC及重结晶法,对狗舌草总碱中非生物碱成分进行分离、纯化,通过MS和NMR对分离到的单体化合物进行初步鉴定.结果:从狗舌草总碱中分离到3个苯丙酸类单体化合物(A4,BI和C1)。b.化合物W的抗肿瘤作用研究通过细胞生长曲线的绘制,分析化合物W对L,2,。细胞的抑制作用;通过MTT比色法,测定化合物IV对L,M,HepGZ和HCC细胞的抑制率;通过流式细胞术(FCM)检测化合物IV对L,2,。细胞周期的影响。结果:在化合物IV作用下,L1

5、21。细胞生长曲线斜率和最大生长密度降低。化合物IV80mg-L"1对L,2,。细胞的抑制率为18.18%;化合物IV320mg-L',对HepGZ和HCC细胞抑制率分别为12.28%和10.24%9FCM检测表明,化合物IV80mg-L'1作用24h后,Lu,。细ii西北农林科技大学2003届硕士学位论文:狗舌草生物碱及抗肿瘤活性成分研究胞的G2-M期细胞明显增加(P<0.01).通过本研究,得到如下结论:*TLC及GC-MS显示,狗舌草中至少含有7个双稠毗咯咙生物碱。其中具有大环双醋结构的千里光宁、千里

6、光非灵和全缘千里光碱为肝毒性双稠毗咯咙生物碱.*首次从狗舌草中分离得到两个生物碱单体,其中之一鉴定为当归酞天芥菜定,另一个结构待定。当归酞天芥菜定是狗舌草中含量最高的生物碱。,当归酞天芥菜定对白血病L121。细胞有一定的抑制作用,对肝癌HepG2和HCC细胞作用较差。对L121。细胞的作用发生在细胞周期的G2-M期。狗舌草总生物碱毒性较大,将狗舌草全草药用会有很大的风险首次从狗舌草中分离得到三个苯丙酸类单体化合物,结构待定关键词:狗舌草;双稠咄咯吮生物碱;LDsu>当归跳天芥莱定;L1210细胞摘要ABST

7、RACTTheextractionof7劫hroseriskirilowii(Turcz.)Holub.by60%ethanol,whichmainlycontainedalkaloidsandflavonoids,possessedinhibitoryefectsonleukemiaL1210cells.TofurtherdeterminethepharmacologicalactivityandtoxicityofT.kirilowiiandselectitsefectivecompositions,i

8、tsalkaloidswereanalysed,theLD5ovalueofitstotalalkaloidswasdetermined,andtheanti-tumorefectsofanalkaloidfromtheplantwereresearchedinthestudy.1.TheextractionoftotalalkaloidsandtestingofN-oxidefromT.kirilowiiThe

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