瓜类细菌性果腐病病原菌鉴定和生物学特性的研究

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1、福建农林大学硕士学位论文瓜类细菌性果腐病病原菌鉴定和生物学特性的研究姓名：李鹏申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：唐乐尘;古勤生20060401福建农林大学硕』：学位论文摘要本研究采用现代分子生物学鉴定技术与传统的生物学研究模式相结合的途径，对瓜类细菌性果腐病病原菌鉴定和生物学特性进行了多项研究。对河南省发生的疑似细菌性果腐病的病株上分离到的2个菌株进行了形态特征、致病性、寄主范围、酶联免疫吸附测定及分子生物学鉴定，确定引起细菌性果腐病的病原菌是燕麦嗜酸菌西瓜亚种Acidovoraxavenaesubsp．citrulli。证实了在河南省种植的西瓜、甜瓜上有细菌性

2、果腐病发生。利用通用引物将河南、海南以及美国的菌株进行DNA．ITS序列分析表明河南及海南的菌株与美国菌株的ITS序列的同源性分别达到98．67％和99．55％。在温室中针对影响该病害发生的因素，如菌液浸种时间、接种温度、种表带菌量等进行了考察。菌液浸种时间对病害发生的影响表明：浸种30min和Ih的发病率最高，达到95％。说明该病原菌在种表的吸附特别迅速。接种温度对病菌侵入的影响表明：高温有利于该病害的发生。35。C最适合病原菌的侵入。西瓜种子表面带菌量对病害发生的影响试验结果显示：从104CFu，ml～108CFU／ml均可造成发病，在108CFU／ml达到发病高峰。

3、说明该病菌具有极强的致病力。通过田间接种西瓜花和幼果，考察了大田中病害的发生情况。结果显示：接种花后形成的果实全部不表现症状。接种幼果三周后的症状表现为两种情况：限制型病斑和扩展型病斑。花期和坐果期病原菌都可以侵入导致种子带菌。花期也是该病原菌侵染的重要时期。果实表面呈限制型病斑的西瓜其种子也可以带菌。幼苗发病率随着菌株或者同一菌株接种部位的不同存在显著差异。病害发生与幼苗生长期的试验结果表明：带菌种子播种后的1至2周是发病的高峰期，也是田间病害防治的关键期。关键词：瓜类细菌性果腐病；Acidovorax口啪卯subsp．citrulli；ITS序列；致病性；接种福建农林

4、大学硕士学位论文ABSTRACTThestudyhascarriedonseveralresearchtocucurbitbacterialfruitblotchthroughmodemmolecularidentificationandtraditionalbiologicalmethods．TwostrainswereisolatedfromthediseasedplantwhichwassuspectedtobethecucurbitbacterialfruitblotchthatoccuredinHenanprovinceofChina．Accordingtoth

5、eirmorphology,culturalcharacteristics，pathogenicity，hostrange，ELISAandmolecularidentification，thestrainswereidentifiedaspathogenAcidovoraxavenaesubsp．citrulli(acronym：Aac)．ItwasthefirstdemonstrationthatwatermolonandmelonbacterialfruitblotchinHenanwascausedbyAcidovoraxavenaesubsp．citrulli．

6、TheIntergenicTranscribedSpacers(ITS)regionbetween16Sand23SrDNAgeneswereamplifiedbyuniversalPCRprimers．TheresultshowedthatITSsequencesofthestrainsinHenanandHainanwereupto98．67％and99，55％witllthesimilarityofAmericanstrainFC520respectively．Somefactorsrelatedtothecucurbitbacterialfruitblotchwe

7、reinvestigatedinthegreenhouse，suchastimeofseedsimmersioninpathogensolution，temperatureaffectinginvasionbypathogen，thequantitiesofpathogenonseedssurface．Thetimeofseedsimmersioninpathogenshowedtheincidenceofdiseasewashighestwhenseedssoakedin30minandlhwithdiseaseincide