TNFα、TNFRⅡ及其基因多态性与早产的相关性研究

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1、声明尸明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。虹．本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的，论文成果归四川大学所有，特此声明。申请人指导教师ⅡuJil大学临床医学博士专业学位论文研究生：蒲杰导师：曾蔚越教授缩写bpcDNACKDABDEPCdNlPEBELISAIHCIODJNKU塔U’一BNF—KBo

2、DPBSPcRPGsmRFLP英语缩略词表(按宇母顺序排列)英文全称中文全称basepair碱基对complementaryDNA互补DNAcytokine细胞因子diaminobenzidine二氨基联苯氨diethylpyrocarbonate。焦磷酸二乙酯deoxyribonucleosidetriphosphate三磷酸脱氧核糖核苷ethidiumbromide溴化乙锭enzyme—linkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附测定imunohistochemistry免疫组织化学integralopticaldensity积分光密度JIJNN-terminal

3、kinaseJUN氢基末端激酶lipopolysaccharide脂多糖lymphotoxin-8淋巴毒素一BnuclearfaetorKB核因子KBopticaldensity吸光度phosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液polymerasechainreaction聚合酶链反应prostaglanflins前列腺素pretermdelivery早产restrictionfragmentlengthl：olymorphism限制性片段长度多态性revolutionsperminute转／分四川大学临床医学博士专业学位论文研究生：蒲杰导师：曾蔚越教授RT-PCRre

4、versetranscriptionpolymerasechainreaction逆转录聚合酶链反应SHPSPnAvcAMsinglenucleotidepolymorphismstreptavidin-perioxidaseconjugatedmethodthromhoxaHezvascularcelladhesionmoleculer2单核苷酸多态链亲和素一过氧化物法血栓烷素A血管细胞粘附分子四川大学临床医学博士专业学位论文研究生；蒲杰导师：曾蔚越教授TNF-ot、TNFRII及其基因多态性与早产的相关性研究研究生蒲杰导师曾蔚越教授中文摘要权目的：探讨肿瘤坏死因子(TNF-a)、

5、肿瘤坏死因子受体Ⅱ(1NFRII)及其基因多态性与早产、早产遗传易感性的关系，寻找早产的遗传学病因，从根本上解释细胞因子TNF．瑾及其受体TNFRII在早产发病中的作用。方法：对46例早产患者(根据胎盘病检有无绒毛膜羊膜炎分为早产感染组21例和早产非感染组25例)母血、胎盘组织和同期足月正常产50例母血、20例胎盘组织进行研究。(1)应用反转录聚合酶链反应(RPPCR)测定胎盘组织中TNF-o．mRNA、TNFRIImRNA的表达水平；(2)用免疫组化法检测TNF-a、TNFRII在胎盘组织上的定位与表达；(3)采用酶联免疫吸附法(EuSA)测定母血清俐F-a、sTNFRII的水平；

6、“)以聚合酶链反应一限制性内切酶长度多态性(PCR--RFLP)技术对TNF-ct基因308位点、TNFRII基因196位点多态性进行检测。结果：(1)早产感染组孕妇胎盘组织中TNF-a、TNFRIImRNA和蛋白表达量及血清中TNF_a、sTNFRlI水平明显高于早产非感染组和正常足月产组，差异均有显著性(尸<0．05)；(2)TNF-a阳性颗粒主要表达于胎盘绒毛膜板的蜕膜细胞、绒毛合体滋养细胞、羊膜细胞和少量细胞滋养细胞中的胞浆，偶见胞核。TNFRII阳性颗粒主要表达于胎盘绒毛膜板的蜕膜细胞、少量细3‘四川大学临殊医学博士专业学位论文研究生：蒲杰导师：曾蔚越教授胞滋养细胞的胞膜和

7、部分胞浆。两者在感染性早产组阳性细胞数量均显著增多。染色明显增强(P<0．05)。(3)TNF-a基因308位点A等位基因、GA(AA)基因型在早产组中的分布频率明显高于正常足月产，其对应的OR值分别为2．169和2．929，差异均有显著性(PO．05)；(4)在早产患者中TNF—c【基因308位点GA(AA)基因型与GG基因型比较