雌性大鼠性腺轴系的衰老变化及中药何首乌饮延缓衰老机制的研究

《雌性大鼠性腺轴系的衰老变化及中药何首乌饮延缓衰老机制的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、英文缩写英文缩写14河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。、研究生签名：狮导师签名：乏鼋么。每院领导签名：少孑年够月硌日研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他

2、人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：办研导师签名：乏么舻瑚急年够旯曙Et中文摘要雌性大鼠性腺轴系的衰老变化及中药何首乌饮延缓衰老机制的研究摘要衰老作为一种正常而复杂的生命过程，涉及机体的不同组织、细胞的一系列特定程序性变化。下丘脑一垂体．性腺轴(H．P．G．A)的发生发育、成熟与衰老是生命活动的重要方面。免疫．神经．内分泌网络在衰老过程中起重要作用，而H-P．G．A是该网络的重要组成部分。众多研究表明，细胞衰老过程是借助于信号传导途径实现的，许多细胞因子亦参与到这些信号途径中。当这些途径所涉及的关键调节因子

3、发生改变，细胞将延缓衰老或绕过衰老程序继续增殖。本实验采用D．半乳糖致亚急性衰老的雌性大鼠模型，以细胞衰老信号转导途径中涉及的关键调节因子p53、p19ARF、Rb及p16等为介入点，从分子生物学角度探讨何首乌饮对延缓下丘脑．垂体．卵巢轴(H⋯POA)衰老的作用机制，并且通过检测下丘脑、垂体、卵巢组织IGF．1、IGF．BP、TNF．Q、EGF、EGFR的表达及电镜超微结构变化等，从多层次、多环节阐明哺乳动物衰老机制，以及何首乌饮对下丘脑．垂体．卵巢轴的抗衰老作用。1．目的应用RT-PCR、Westernblotting、原位杂交及免疫组化方法检测衰老模型大鼠下丘脑

4、、垂体、卵巢组织p53、．p19ARF、Rb和p16、EGF、EGFR、TNF．a、IGF．I、IGFBP3的表达，并且从下丘脑、垂体和卵巢三个层次来观察H．P—G．A衰老的组织学变化，以及何首乌饮对该轴的作用，从而探讨大鼠性腺轴的衰老机制，分析何首乌饮抗衰老的作用。2．方法2．1实验动物的选取、分组及模型的建立：选用8周龄清洁级SD雌性大鼠96只随机分为正常组、模型组、预防组。预防组又分为何首乌饮低剂量组、何首乌饮中剂量组、何首乌饮高剂量组、何首乌丸组，每组动物各16只。用6％的D．半乳糖溶液腹腔注射的方法连续用药60d，建立亚急性衰老大鼠模型。预防组在腹腔注射D

5、．半乳糖溶液的同时给药何首乌饮、何首乌丸。中文摘要2．2标本的采集及研究方法：连续用药60d后，取各组大鼠的下丘脑、垂体前叶和卵巢新鲜组织，应用RT-PCR法检测其p53、p19埘、Rb、p16及IGFBP3的基因水平，应用Westernblotting方法检测Rb及p16蛋白的表达。将各组大鼠用不同的固定液进行左心室灌注，最后取其下丘脑、垂体前叶、卵巢组织，应用免疫组化法检测p53、EGF、EGFR、n吓．仅蛋白的表达，应用原位杂交技术检测IGF．ImRNA的水平，应用透射电镜观察下丘脑、垂体前叶及卵巢组织超微结构的变化。3．结果3．1大鼠下丘脑．垂体．卵巢轴p1

6、9删’／p53／p21dpl和p16INK4讯b衰老途径中关键调节因子发生改变，应用何首乌饮可纠正这些因子的过度表达：3．1．1PCR结果显示，模型组大鼠下丘脑、垂体前叶、卵巢组织中p53基因表达明显高于正常组(P

7、处理后，p53染色比模型组降低(P