氧化型低密度脂蛋白诱导肝窦内皮细胞植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1的表达

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1、中华糖尿病杂志2014年7月第6卷第7期ChinJDiabetesMellitus，July2014，Vo1．6，No．7·529．论著氧化型低密度脂蛋白诱导肝窦内皮细胞植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1的表达刘静王云芳牛瑞兰张琦权金星田利民【摘要】目的探讨植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白(ox—LDL)受体1(LOX一1)在肝窦内皮细胞(HSECs)中的表达和ox—LDL对其表达的调控作用。方法使用实时定量聚合酶链反应(RT—PCR)和Westernblotting法从基因和蛋白水平检测未经处理HS

2、ECs中LOX一1的表达。应用不同浓度ox—LDL(O、20、40、60、80和100mg／L)对HSECs作用24h并应用80mg／Lox-LDL对HSECs作用不同时间(0、12、24和48h)，作用后实时定量PCR检测HSECs内LOX-1mRNA的表达水平，Westernblotting法检测细胞内LOX．1蛋白表达。给予80mg／Lox—LDL干预组多聚肌苷酸250m#L作用24h后，测定LOX．1mRNA和蛋白的表达。采用单因素方差分析及t检验进行数据分析。结果LOX-1mRNA和蛋白在H

3、SECs中均有表达。20～80mg／Lox—LDL组HSECs中LOX一1mRNA、蛋白表达水平随ox—LDL剂量增加而升高，与剂量有明显相关性(F=38．7、3．43，均P<0．05)。与8Omg／Lox—LDL组相比，100mg／Lox—LDL组LOX一1mRNA、蛋白表达下降，差异有统计学意义(t=23．75、18．26，P<0．05)。80mg／Lox．LDL对HSECs作用时间在0—24h时，随着时间延长，LOX一1mRNA、蛋白表达递增，与ox—LDL作用时间有明显相关性(F：2．36、0

4、．33，均P<0．05)。与作用24h相比，作用48h组HSECs中LOX．1mRNA、蛋白表达下降(t=69．21、36．27，均P<0．05)。与8Omg／Lox—LDL组相比，多聚肌苷酸组中LOX一1mRNA和蛋白表达降低，两组差异均有统计学意义(t=54．93、28．19，均P<0．05)。结论LOX一1存在于HSECs。在一定浓度和时间范围内，ox—LDL对HSECsLOX一1的调控作用具有时间和浓度依赖性，而多聚肌苷酸可部分抑制这种效应。【关键词】肝窦内皮细胞；氧化型低密度脂蛋白；植物血凝

5、素样氧化型低密度脂蛋白受体1Oxidizedlow-densitylipoproteininducedlectin-likeoxidizedlow-densitylipoproteinreceptor-1expressioninhepaticsinusoidalendothelialcellsLiuring，WangYunfang，NiuRuilan，ZhangQi，Q啪nJinxing，TianLimin．DepartmentofEndocrinology，PeoplesHospitalofGans

6、uProvince，Lanzhou73oooo．ChinaCorrespondingauthor：Liuring，Email：liujingwelcome@126．corn【Abstract】0bjectiveToinvestigatethepresenceoflectin—likeoxidizedlow—densitylipoprotein(ox—LDL)receptor一1(L0X一1)inculturedhepaticsinusoidalendothelialcells(HSECs)，andme

7、anwhilediscusstheregulationofitsmechanismsunderox—LDLiniuryconditions．MethodsThemRNAandproteinexpressionofL0X．1wastestifiedbyreal。timequantitativepolymerasechainreaction(RT—PCR)andWesternblottingmethods．MeanwhileHSECswerestimulatedwithdifferentconcentra

8、tionofox．LDL(0，20，40，60，80and100me-／L)for24h，andHSECswerestimulatedwith80mLfordifferenttimes(0，12，24and48h)．ThenexpressionofL0X．1mRNAwasmeasuredbyRT．PCR．andtheproteinexpressionofLOX·1wastestifiedbyusingWesternblotting．Datawereana