衣原体病病原的分离与鉴定_李树根

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1、衣原体病病原的分离与鉴定李树根综述刘福安审校,as更低的温度下组织标本中的衣原体可长期维持其括衣原体病(Chlmydiosi)为鹦鹉衣原体,,。(a。;yd玄as亡ae£、、力保存的温度不要在。一一2〔℃之间反复在ehzp云才)引起的禽类哺乳类节波动,。ra-严重感染的组织内衣原休可在4℃中保持活力动足类及其他动物的疾病的统称《鹦鹉热》由M6。.,n。age群氏于1895首先倡用的后来发现其他非鹦鹉科禽天但在这期间传染的效价二引斩地下降到零(P一,ee:类(包括家禽和野禽)也能感染本病遥My氏1980

2、)。(1941)遂提出《鸟疫》(Ornithosis)这个名词(二)分离方法.:,1病料标本的处理爪无菌操旅采茱的标本加六现已知鹦鹉热和鸟疫只有流行病学方面的差异并没.,,。到营养肉汤或PES(PH了2)中研磨戊20~40%怒有本质上的区别近些年来统称为《衣原体病》,,‘,、、液4℃放置4小时取上清掖接种污染的标本衣原体可引起鹦鹉鸽鸡和其它禽类的隐性或、、1,。鸽子隐性感染较多,因地每毫升可加入链霉素万古霉素卡那霉素毫克慢性感染区不同可达2Q~。.1。.52。50%。、。或庆大霉素一毫克处理小时如采集

3、的标本在美国的火鸡群在欧洲鸭群中传染性最大,迄今1。严重污染时必须在匀浆液中加入链霉素(10毫克/毫已发现0种以上的不同鸟类受到自然感染此,。升)和新霉素(1毫克/毫升)或链霉素(5毫克/毫升)短病广泛分布于五大洲素(。.。2毫克厂毫升)和磺胺嚓咤(2毫克/毫升)或现将国外关于衣原体病的禽病原体分离与鉴定方湘1000eae。r,1978)。。杆菌肤(单位/毫升)(Shht等液体法概述如下,的标本如肝素处理血液和无菌操作采集的腹水可直衣原体的分离。接接种实验动物分离衣原体粪便和细菌污染严重的(一)病料的

4、采取和保存,、组织标本悬浮在20%的链霉素万古霉素和卡那雷1.急性传染的病料采集:急性的、严重感染的衣,‘,。溶液中1000转分钟离心三次每次30分钟每次,,素原体病动物在剖检时可采集病变器官的分泌物或,,、、离心后提取上清液的中间部分作为下次离心液而有充血的组织充血的肺组织有病变的脾和肝的组。,、、其它任何漂动的材料或沉淀物废弃第三次离心后织块增厚的有分泌物被复的气囊膜或分泌液充血提取中间层溶液作为接种用(Storz,1971)。所有、结膜或鼻的分泌物,部位的肠粘膜或结肠的内容物,,磨碎和匀浆化的操

5、作穆序必须是无菌的在安全罩下活体病料可采集结膜刮落物用棉试子沽取气管和鼻操作目的是防止细菌污染和消除气溶胶感染操作人员,,分泌物在发热期取全血并用肝素作抗凝处理及采。取粪便。的危险2。首选的实脸动物:和培养物实验动物可用鸡2.:温和病例或亚隐性或亚临床感染的病料采集、、,、胚小鼠和豚鼠更普遍采用的是传代细胞系培养临床感染的禽进行尸体剖检时应采集这些禽的肝。,e6ychaChter1978、。物特别是MC细胞(S等)脾肾和结肠内容物等病料作病原的分离呈隐性感。、:。3。5,。小白鼠豚鼠的接种取处理过的标

6、本毫染的禽脾或肝可能会肿大或气囊增厚肠道的亚临,.,升接种于三周龄小白鼠腹腔中(也可同时接种0伪感染床是常见的其病原体可以从新鲜的粪便中分离,,。)6age,1980)毫升于脑内每份标本接种6一只观察21天到(P,3.:采集的标本必须避免接触对所有的衣原休各毒株都能在实验小白鼠中分离繁殖病料标本的保存感染5。衣原体的小日鼠在~15天内死亡毒性强的衣衣原体或细胞有害的物质(甘油对衣原体有灭活的作原体将会产,57。、、生严重的全身性感染一夭后可能发用)常用的保存液为蔗糖磷酸盐谷氨酸盐培养。,「,液。,3生

7、死亡剖检可见器官充血特别是肺部脾和肝肿另外任何组织培养的维持液如~10%小牛血,。清、、,胀以及在腹膜和胸腔有粘稠的渗出物一层纤维蛋培养肉汤脱脂奶等加入抗菌素(链霉素50一,,,白膜可能复盖和围绕肝和脾具有特征性的是所有渗100微克/毫升万古霉素50一10微克Z毫升弗来霉,。素30微克/毫升)都可以用来保存标本在一20℃或出物都含有大量的单核细胞其中许多细胞的胞浆内ae,。有衣原体存在(Pg198。)如果致病力较弱的衣些包涵体是由红色或紫色的原生小体颗粒组成的块,。,原体但是,。小白鼠不一定死亡衣原体

8、可在腹膜的质以及由兰色到紫色较大的始体组成Gimenez,a。。,细胞内增殖和生长而损坏血管的内皮并从腹膜的毛或Mh认Vello氏染色时可见原生小体染成红,,。细血管中渗出浆液在一只六周龄的小白鼠腹腔内这色底色呈兰绿色处于早期发育阶段的衣原体的包,,,on;种液体可增加到加毫升因而引起幼鼠肿胀而不能涵体用Gimez氏染色效果不佳用卵黄囊和胎,活动。这些液体中的单核细胞通常是严重地感染了衣盘印片或在感染了衣原体的细胞培养物中在其发育e,。,。n。原体的(P

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