罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌的抑制机理初探

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1、第31卷第6期咸宁学院学报Vo.l31,No.62011年6月JournalofXianningUniversityJun.2011文章编号:1006-5342(2011)06-0067-03*罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌的抑制机理初探1123刘小红,邓业成,唐煌,陈洪国(1.广西师范大学生命科学学院/珍稀濒危动植物生态与环境保护省部共建教育部重点实验室,广西桂林541004;2.广西师范大学药用资源化学与药物分子工程教育部重点

2、实验室,广西桂林541004;3.咸宁学院化学与生命科学学院,湖北咸宁437100)摘要:探讨罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌的抑制活性及作用机理,采用生长速率法测定罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌菌丝体生长的抑制作用;采用倍比稀释法测定罗默碱最小抑菌浓度(MIC);采用外渗电导法测定罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌菌丝体细胞膜渗透性的影响;并且测定了罗默碱对菌体可溶性蛋白含量的影响.结果发现罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌有不同程度的抑制活性,其MIC分别为0.25g/L和1g/L;用0.2g/L的罗默碱处理梨锈病菌和梨褐斑病菌菌丝体,结果显示

3、其细胞膜的相对渗透率分别为11.82%和2308%;用0.2g/L的罗默碱处理梨锈病菌和梨褐斑病菌菌丝体,其对蛋白质合成的抑制率分别为60.06%和3246%.得出结论罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌均具有一定的抗菌作用,并且可以不同程度的影响梨锈病菌和梨褐斑病菌菌丝体细胞膜的渗透性和可溶性蛋白的含量.关键词:罗默碱;梨锈病菌;梨褐斑病菌;抑制机理中图分类号:Q81文献标识码:A梨锈病又名赤星病,俗称羊胡子,病原属担子菌亚供理论依据.门胶柄锈属真菌,是梨树重要病害之一,在我国南北果区均1材料与方法有发生.主要危害梨树的幼嫩绿色部分,

4、如幼叶、叶柄、幼果1.1材料及新梢.梨锈病的诊断要点可以概括为:病部橙黄、肥厚肿1.1.1供试罗默碱胀、初生红点渐变黑、后长黄毛细又长.梨褐斑病又名白星由药用资源与分子药物化学教育部重点实验室合成,病和斑枯病,危害梨叶,严重时能造成梨叶枯焦,大量落叶.包含l型和d型两种异构体.最初在叶片上发生圆形或近圆形的褐色病斑,以后逐渐扩1.1.2供试病原菌大.发病严重的叶片往往有病斑数十个之多,以后相互愈合梨锈病菌GymnosphorangiumharaeanumSyd.;呈不规则形的褐色大斑块,病斑初期为褐色,后期中间褪呈梨褐斑病菌Myco

5、sphaerellasentina(Fr.)Schroeter.灰白色.病斑上密生黑色小点,中层褐色,外层则为黑色.通过从田间采集植物发病部位,在室内用马铃薯蔗糖目前,这两种梨树病害的防治主要是消灭侵染来源和琼脂培养基(PDA)分离纯化获得.并通过科赫法则检验.化学药剂防治等.消灭侵染来源主要是砍掉果园周围的桧1.2方法柏等植物,这样做增加了生产成本.化学药剂使用存在不安1.2.1罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌的抑制作用[4]全、对环境污染大、对牲畜有毒害等缺点,并且由于化学药参考陈年春的菌丝生长速率法进行测定.并根据下剂大量和长期使用,各

6、地病原菌对一些药剂产生了不同程式求出抑制率:度的抗性,防效大幅度降低.因此,研究和开发对梨锈病和菌落直径(cm)=测量直径-0.4梨褐斑病均有效的新型杀菌剂具有重要意义.抑制率(%)=(对照菌落直径-处理菌落直径)/对罗默碱(Roemerine)又叫莲碱、斑点亚洲罂粟碱、绕袂照菌落直径100碱,是阿朴菲类异喹啉生物碱.邓业成等报道了广西地不容测定有效中浓度时,用等体积丙酮和水的混合溶剂配中l-罗默碱对水稻褐飞虱的杀虫活性及对4种农作物病制5个以上系列浓度的药液,测定各个浓度的抑菌率,用最[1,2]原菌的抑菌活性,骆海玉等报道了罗默碱对水稻白

7、叶小二乘法求出毒力回归方程、有效中浓度EC50等.[3]枯病有较强的抑制作用.但是,其抑菌作用机理未见报1.2.2罗默碱对梨锈病菌和梨褐斑病菌最小抑菌浓度道.本文在室内初步探测了罗默碱对梨锈病菌的抑菌活性(MIC)的测定及机理,以期为开发防治梨锈病和梨褐斑病的新型农药提采用倍比稀释法:将罗默碱稀释液与PDA培养基混合*收稿日期:2011-03-20基金项目:广西自然科学基金资助项目(桂科自0991097)68咸宁学院学报第31卷均匀,制成不同浓度梯度的含药平板,接种100l含菌量约表1罗默碱对2种供

8、试病原真菌的抑制活性和毒力4为510个/mL的菌悬液,用无菌涂棒涂布均匀.同时以-1a)供试病菌毒力回归方程(y=)相关系数rEC50(95置信限)/gL相对毒

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