原稿桑枝总黄酮提取分离及抗氧化活性研究

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1、桑枝总黄酮提取分离及抗氧化活性研究中文摘要桑树为灌木或落叶乔木，桑属植物体的各个部分在传统医学上均可入药，历代中国药典均收载了桑叶、桑枝、桑白皮、桑椹的药用功效。桑枝是桑科桑属植物桑MorusalbaL.的干燥茎，含有很多生物活性的物质，如黄酮、生物碱、甾体、香豆素、二苯乙烯、萜类化合物等，其中黄酮类化合物具有抗氧化、抗突变、抗衰老、抗肿瘤等广泛的生物活性，但尚未得到有效利用。本文以桑枝为原料，对桑枝总黄酮的提取分离纯化及抗氧化活性等方面作了较为系统的研究，主要研究内容和实验结果如下：1桑枝皮总黄酮提取工艺的研究本实验考察了提

2、取时间、乙醇浓度、料液质量浓度及温度对总黄酮提取效果的影响，在此基础上利用正交试验，采用极差和方差分析法确定了总黄酮的最佳提取工艺条件：温度为80℃、料液质量浓度33g/L、乙醇体积分数70%、浸提时间2h。在该条件下，其提取率可达1.01%。2桑枝总黄酮的分离纯化本实验研究了聚酰胺分离纯化桑枝总黄酮的静态吸附和动态吸附的技术参数，聚酰胺树脂静态吸附静态吸附桑枝总黄酮上样量为1：274g/g（净黄酮量：树脂量），动态吸附上样量为1:61（g/g）。上样浓度为2.149mg/ml，上样量为2BV，吸附流速和解析流速均为1ml/m

3、in，吸附时间为1h，70%乙醇作为洗脱剂，其总黄酮的洗脱量可达92.29%。3一种黄酮类化合物桑色素的分离纯化及鉴定采用95%乙醇浸提，有机溶剂萃取，聚酰胺树脂吸附色谱法对桑色素进行分离纯化；用薄层层析色谱与高效液相色谱相结合的方式进行定性分析。结果表明此方法可得到高纯度的桑色素。4几种黄酮类化合物和桑枝总黄酮体外抗氧化活性的研究本实验以ve做对照，从清除自由基能力和还原能力两方面评价了芦丁、槲皮素、桑色素和桑枝提取分离物的抗氧化能力。对DPPH·的清除能力：槲皮素的清除能力最强，是ve的1.4倍，桑色素和桑枝皮总黄酮清除能

4、力相近且弱于槲皮素，芦丁清除能力最弱。在0.02-0.08mg/ml范围内，槲皮素的还原能力最强，桑色素和桑枝皮总黄酮与ve的还原能力相近且弱于槲皮素，芦丁的还原能力最弱。5不同桑树品种资源桑枝总黄酮含量的比较本实验对西南大学桑树种质资源圃中农民广泛种植的几种桑树栽培品种的桑枝总黄酮含量进行了测定比较，结果显示，不同品种之间桑枝总黄酮含量的差异较大,嘉陵20号>西农6071>桂优62>嘉陵16号>湖桑32>云桑1号>7920。关键词：桑枝：总黄酮：提取：分离纯化：抗氧化活性第一章文献综述桑树属桑科（Moraceae）桑属（Mo

5、rusL.），为落叶乔木或灌木。植物体含乳液，树皮黄褐色，叶互生，卵形或椭圆形，花单性，雌雄异株，雄花成柔荑花序，雌花成穗状花序，花期4月至5月，果期6 月至7月。桑树为多年生叶用经济作物，喜光、耐寒、耐旱、耐瘠薄、耐烟尘、抗风、抗有毒气体，适应性强，原产我国中部，有约四千年的栽培史，栽培范围广泛，东北自哈尔滨以南；西北从内蒙古南部至新疆、青海、甘肃、陕西；南至广东、广西；东至台湾；西至四川、云南；以长江中下游各地栽培最多，垂直分布大都在海拔1200m以下。我国是世界上桑种资源最多的国家，共有15个桑种，5个变种。其中栽培的有

6、：鲁桑(M.multicaulis)、白桑(M．alba)、广东桑(M．atropurpurea)、山桑(M．bombycis)、瑞穗桑(M．mizuho)。野生种有长穗桑(M．wittiorum)、长果桑(M．laevigata)、黑桑(M．nigra)、华桑(M．cathayana)、细齿桑(M．serrata)、蒙桑(M．mongolica)、川桑(M．notabilis)、唐鬼桑(M．nigriformis)、滇桑(M．yunnanensis)、鸡桑(M．australis)。变种有鬼桑(M．mongolicavar.

7、duabolica)、大叶白桑(M．albavar.macrophylla)、白脉桑(M．albavar.venose)、垂枝桑(M．albavar.pendula)、鞑靼桑（M．albavar.tatarica）等。桑枝为桑科植物桑（MorusalbaL）的干燥嫩枝,嫩桑枝呈长圆柱形，表面灰黄色或黄褐色，有黄褐色点状皮孔及细纵纹，并有灰白色略呈半圆形的叶痕和黄棕色的腋芽。质地坚韧不易折断，断面具纤维性，皮部较薄，木部黄白色，射线放射状，髓部白色或黄白色。气微，味淡略苦。1.1桑枝的药理作用研究进展来源于桑科植物(Morusa

8、lbaL．)的药材，包括桑叶、桑枝、桑椹、桑白皮，具有良好的降血糖、降血脂、提高免疫力、抗衰老等药理活性，对于糖尿病及其并发症有预防和治疗作用，因毒副作用小而适宜长期服用。近年来，国内外学者重点研究了桑类药材的降糖成分和作用机制，同时加强了对其有效单体的分离和筛选。1.1.1