0铁皮石斛内生真菌的分离与鉴定

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1、信阳师范学院学报：自然科学版JournalofXinyangNormalUniversity第22卷第2期2009年4月NaturalScienceEditionVo1．22No．2Apr．2009DOI：10．3969／j．issn．1003-0972．2009．02．019铁皮石斛内生真菌的分离与鉴定陈玉栋，李文锦，雷玲，刘改艳，卢东升(信阳师范学院生命科学学院，河南信阳4640O0)摘要：从铁皮石斛(Dendrobiumcandidum)的根、茎、叶中分离获得内生真茼共30株，经显微形态观察将其中20株鉴定为3个目、4个科

2、、9个属．结果表明，铁皮石斛不同部位内生真菌的数量、分布和种群存有差异．关键词：铁皮石斛；内生真茵；分离；鉴定中图分类号：Q936文献标志码：A文章编号：1003-0972(2009)02-0236-03IsolationandIdentificationofEndophyticFungifromDendrobiumcandidumCHENYu·dong’，LIWen-jin，LEILing,LIUGai-yan，LUDong-sheng(Co~egeofLifeSciences，XinyangNormalUniversity，

3、Xinyang464000，China)Abstract：Thirtystrainsofendophyticfungiwereisolatedfromtheroot，stemandleafofDendrobiumcandidum，andtwentystrainsofthemweremorphologicallyidentifiedbelongtoninegenera，fourfamiliesandthreeorders．Ithasshownthatquantity，species，anddistributingoftheendo

4、ph~icfunsivariedindiferentpartsofDendrobiumcandi·dur,rKeywords：Dendrobiumcand~um；endophyticfungi；isolation；identification0引言生资源已遭严重破坏，被列为濒危保护的中药品种]．近年来，对石斛内生真菌的分离主要集中于内生真菌(endophyticfunsi)是指那些在其生用石斛的根来分离与其共生的菌根真菌，一般是作活史中的某一段时期生活在植物组织内，对植物组为兰科植物之一来进行的⋯，专门系统地进行石织没有引起明显

5、病害的菌，它包括那些在其生活史斛内生真菌分离鉴定的很少¨．本实验从铁皮石中的某一阶段营表面生的腐生菌，对宿主暂时没有斛的根、茎、叶中分离出内生真菌并对其种类和分伤害的潜伏性病原菌和菌根菌⋯．内生真菌因其布进行了初步研究，旨在为提高铁皮石斛的人工栽独特的生活环境，与宿主关系密切．它可增强宿主培技术、试管苗成活率和药物开发提供理论依据．的生长，并能提高宿主的抗逆性及病毒的抵抗能力J．此外，植物内生真菌还能够产生结构新颖，1材料和方法功能特殊的次生代谢产物，是新化合物、新药物的1．1实验材料潜在资源．因而，研究植物内生真菌与其宿主3年

6、以上生铁皮石斛，系组培苗栽培而成，长的相互关系具有重要意义．势一直良好，无其他病虫害，其培养土壤为珍珠岩石斛(Dendrobium)是兰科石斛属多年生附生与腐殖土按1：1的比例混合成．草本植物，主要分布于西南和江南各省，是经济价1．2分离培养基值和医用价值颇高的名贵中药．铁皮石斛(Den-分离培养基为马铃薯葡萄糖培养基(PDA)，drobiumcandidum)是石斛类的极品，具有抗肿瘤，每升含氯霉素60mg，用于抑制细菌的生长．抗衰老，增强免疫力等多种功能]．由于石斛自然分布较少，生长缓慢，繁殖率低以及过度采伐，其野日稿日期：

7、2008439-28；修订日期：2008·11．06：·．通讯联系人。E-mail：ydchen999@yahoo．corn．ca基金项目：河南省科技计划项目(082102130029)；河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(教高[2007]335)作者简介：陈玉栋(1971·)，男，河南淮滨人，副教授，博士，主要从事内生真菌的分离与鉴定．236陈玉栋，等：铁皮石斛内生真菌的分离与鉴定1．3内生真菌的分离sp．)为优势种群，占总数的23．3％，其次是曲霉属1．3．1样品消毒处理(Aspergillussp．)占10％，轮枝霉属

8、(Verticillium取铁皮石斛植株用自来水冲洗干净、去腐叶、sp．)占10％．晾干水分后，转到无菌操作台上进行下面处理：根2．2铁皮石斛内生真菌在植物器官中的分布和茎剪成约3cm的小段，叶片剪成约3cm×3cm2O株内生真菌的分布各有特点．根部和茎部小片，