胚胎培养和胚乳培养

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1、第四章胚胎培养和胚乳培养被子植物双受精（doublefertilization):二倍体合子三倍体胚乳幼胚培养:Hanning（1904）；Laibach（1925）最先付诸应用的植物细胞工程技术：20世纪20年代建立的幼胚培养和胚胎拯救（embryorescue)技术中国学者在裸子植物胚胎培养方面的工作1934清华的李继侗和沈同发现银杏胚乳提取物可刺激离体胚生长1941VanOverbeek发现椰乳对幼胚发育的促进作用1943罗士韦和王伏雄在Science发文章，离体培养云南松和云南杉幼胚成功。胚乳培养的意义胚乳：三倍

2、体★胚乳细胞中储存大量淀粉、蛋白质和脂类，是研究这些产物代谢工程的理想系统★完全由薄壁细胞组成的均质组织，是实验形态发生学研究的极好材料。★胚乳植株－三倍体，高产、优质、果实无籽1940LaRue最先培养胚乳1970Bhojwani白花寄生获得胚乳植株1977，1978母锡金王大元第一节胚胎培养一、成熟胚培养☆盾片在胚吸收营养上有重要作用☆胚胎培养可以解除种皮抑制作用☆½MS适用于多种植物成熟胚培养成功例子：杂种桃成熟胚培养与新品种培育植物胚胎的发育时期二、幼胚培养幼胚在胚珠中异养，离体培养必须提供足够的营养和适宜的条件

3、。双子叶植物胚胎的发育时期：合子（zygote），二细胞原胚（two-celledproembryo），球形胚（globularembryo），心形胚（heart-shapedembryo），鱼雷形胚（torpedo-shapedembryo），拐杖形胚（walking-stick-shapedembryo），倒U形胚（invertedU-shapedembryo），成熟胚（matureembryo）心形胚以后的双子叶胚较易培养，球形胚很难培养。单子叶植物胚胎的发育时期与双子叶植物有很大不同。幼胚的培养☆常用培养基：Ni

4、tsch、MS、1/2MS禾谷类也用N6和B5☆幼胚培养需要的蔗糖浓度高于成熟胚，可用代谢上惰性的甘露醇部分代替蔗糖来调节渗透压。☆VB1和生物素对胚胎发育有重要作用。☆一般不需要外用激素。☆八分成熟的椰乳对幼胚促进最明显。☆胚乳看护培养（nurseculture）☆弱光或黑暗培养防止幼胚的提前萌发幼胚的提前萌发：未成熟胚在培养基上未发育为成熟胚，而提前生长为瘦弱和畸形幼苗的现象。抑制幼胚提前萌发的因素：提高培养基中蔗糖浓度（>10％）；加入ABA（0.01~0.2mg/L）和酪蛋白水解物（200～500mg/L）；高温

5、（32℃）、强光培养。ABA可抑制幼胚吸水，使其脱水干燥，发育成熟。操作实例和经验双培养基大麦幼胚培养基：B51/2MS无机盐＋MS有机成分普适于各种禾谷类幼胚培养肌醇添加胚胎培养的应用11、拯救杂种胚获得稀有杂种胚胎拯救：种间或属间杂交时，两个基因组表达不协调，多数情况下胚乳最先败育，胚仍然健康，可通过离体胚培养将杂种幼胚培养成植株，称为胚胎拯救。把握好胚胎拯救的时间；盾片的作用；冷处理；先诱导杂种胚产生愈伤，再分化出杂种植株。胚胎培养的应用22、产生单倍体：染色体消除之后，剥离胚培养3、缩短育种周期：打破休眠4、稀有

6、植物的繁殖：Makapuno第二节胚乳培养和三倍体的产生☆多数情况先诱导胚乳细胞增生愈伤组织，再诱导愈伤分化器官或胚状体胚和胚乳一起培养有利于胚乳愈伤形成，但之后就应去掉，免得胚愈伤与之混淆☆胚乳培养的应用前景：胚乳细胞分裂不规则，胚乳植株中既有三倍体，也有许多非整倍体。☆三倍体的经济价值：无籽果实；生物量高；品质好；获得三体以进行基因定位。