小动物寄生虫病学实验指导

《小动物寄生虫病学实验指导》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、实验指导实验一小动物线虫的形态观察［实验目的及要求］熟悉线虫的基本构造，掌握小动物常见线虫的主要形态特征。［实验材料和试剂］光学显微镜，手持放大镜，银子，解剖针，平皿，载玻片与盖玻片。乳酸酚透明液。浸渍标本：钩口科线虫、尾旋科线虫等，病理标本。［实验内容］（一）线虫的一般形态构造圆柱状，两端逐渐变细，有的呈线状或毛发状。整个虫体一般可分为头端、尾端、背面、腹面及侧面。雌雄异体，雄虫较小后端弯曲。1体表：线虫的体表为一层无色、略半透明的角质所覆盖。许多角皮还分化形成了多种特殊组织构造，包括头泡、颈泡、唇、

2、叶冠、颈翼、侧翼及尾翼、尾感器等。2消化系统：线虫消化系统呈管状。包括口腔、肌质结构的食道和管状的肠。3排泄系统：分原始的腺型和管型两类，无尾感器线虫为腺烈，有尾感器的线虫排泄系统为管型。4神经系统：神经环是线虫神经系统的屮枢，位于食道周围。5生殖系统：线虫为雌雄异体，生殖系统均为丝状管道。雄虫生殖器官通常为单管状，由一个睾丸、一个输精管、贮精囊以及一个通向泄殖腔的射精管组成，末端有辅助生殖器。雌虫生殖器官通常为双管型,由卵巢、输精管、受精囊、子宫、阴门和一般较短的阴道组成。有的线虫有排卵器。6虫卵：大

3、小差异很大，卵膜由内膜、屮间层和蛋白膜组成。（二）小动物常见线虫及虫卵形态特征1.犬恶心丝虫双瓣科、恶丝虫属。寄生于犬的右心室和肺动脉。成虫细长白色。雄虫尾部呈现螺旋状卷曲。120~160俪2.犬弓首蛔虫弓首科，弓首属。寄生于犬和犬科动物的小肠。虫体浅黄白色，头端三片唇。虫卵近于球状，表面不光滑。50^110mm3.猫弓首蛔虫弓首科，弓首属。寄生于猫和猫科动物的小肠中。与犬弓首虫相似，只是颈翼膜短而宽，虫体前端如箭头状。40"100mm4.鸡翼刺线虫尖尾目，异刺科，异刺属。寄生于鸡鸭鹅等的盲肠。白色小型

4、线虫。7^13mm5.毛细线虫寄生于犬、猫的支气管和气管内。虫体细长，乳口色。雄虫体长15~25mm,尾部有2个尾翼和一根带鞘的交合刺。雌虫长20^40mm,阴门开口于接近食道的末端。虫卵呈腹鼓形，卵壳厚，两端各有一个卵塞。6.钩虫虫卵椭圆形，壳薄，无色透明。卵内多有4〜8个胚细胞，胚细胞与卵壳间有明显的空隙。1.类圆线虫类圆线虫寄生于犬、猫的小肠。雄虫尾端向腹面卷曲，具2根交合刺。雌虫半透明，体表具细横纹，尾部尖细，子宫前后排列，其内各含8〜12个虫卵。2.类圆线虫虫卵虫卵为椭圆形，壳薄、无色透明，形

5、态与钩虫卵相似，但部分虫卵内含有幼胚。［实验计划］1.分别用肉眼和显微镜观察各种线虫的形态特征，了解熟悉其分类位置。2.镜下观察各种蛔虫卵、钩虫卵等，注意各自特点。3.清理实验用品，完成课堂作业。［思考］1.画出线虫的基本形态构造图，并注明各构造名称。2.描述各种线虫的形态特征，及宿主和寄生的部位。3・Whatisthestructureofeelworm?seggs?实验二小动物寄生虫病的免疫诊断技术目前兽医寄生虫主要的诊断方法有临床诊断、病原学检测、免疫学检测、分子生物学检测，现在详细介绍四个实验来

6、学习小动物寄生虫病的免疫诊断技术：间接血凝实验，乳胶凝集实验，酶联免疫吸附实验，免疫印迹技术。（一）间接血凝实验［实验原理］间接血凝试验（IndirectHaemagglutinationTest,IHA）是将可溶性抗原吸附在比其体积大千万倍的红细胞表而上，使红细胞产生一种新的血清学性质，制成所谓的的致敏红细胞，即可用于诊断病原。只要与少量和应的抗体相遇，红细胞通过抗原抗体反应，即可被动地结合在一起，呈现肉眼可见的凝集现象。［主要试剂和器材］冰箱；震荡器；96孔血凝板；移液器；稀释液；阳性对照血清;阴性

7、对照血清；致敏红细胞；被检血清［实验步骤］1.先将96孔血凝板按血清编好号，每份血清一排（8孔），每一板都设阳性和阴性血清各一排，每排最后一孔为致敏红细胞空白对照。2.每孔加入稀释液75ul,吸取待检血清25ul,加于每排第一孔，自左至右按次序作4倍稀释，混合至第七孔时弃25ul混合液，最后一孔作空白对照，同时有两排孔分别做阴、阳性对照。3.将诊断液摇匀，每孔加诊断液25ul,加完后将血凝板在微型振荡器上振荡，在25°C左右恒温静置2-3小时可判断结果。4.红细胞呈膜状均匀沉于孔底，中央无沉点或沉点小如

8、针尖，判为“++++”。［结果判定］1.红细胞虽呈膜状沉着，但颗粒较粗，中央沉点较大，判为“+++”O2.红细胞部分呈膜状沉着，周围有凝集团点，中央沉点大，判为“++”O3.红细胞沉集于中心，周圉有少量颗粒状沉着物，判为“+”o4.红细胞沉集于中心，周围无沉着物，分界清楚，判为“一”o5.以出现“++”孔的血清最高稀释倍数定为本间接血凝试验的凝集效价。小于或等于1:16判为阴性；等于或大于1:64判为阳性。［注意事项］1.红细胞浓度：致敏红