茶叶中咖啡碱含量的测定

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1、茶叶中咖啡碱含量的测定─紫外分光光度法制作人：汪小钢实验目的咖啡碱是茶汤中苦味的重要物质基础，它具有兴奋神经中枢和利尿等药理功能，对茶叶品质有非常重要的影响。因此，测定其含量是化学评价茶叶品质的需要。老人、儿童以及一些不适应咖啡碱人群需要饮用低（或无）咖啡碱茶叶及其制品，对它们进行咖啡碱含量测定也是必需的。茶叶深加工和综合利用的需要。实验原理咖啡碱易溶于水，在274nm左右有强烈的吸收。由于茶叶中儿茶素、没食子酸等多酚类物质在同一波长范围内也有很强的吸收，因此需要用碱式醋酸铅等先除去茶汤中多酚等干扰物质，然后再用紫外可见分光光度计在27

2、4nm测定咖啡碱的吸光度值，根据咖啡碱的标准曲线求得茶汤中咖啡碱的浓度，以此计算茶叶或相关制品中咖啡碱的含量。试剂碱式乙酸铅溶液：称取碱式醋酸铅50克溶于100毫升水中，静置过夜，倾出上清液过滤备用。0.01M盐酸溶液：取盐酸0.9毫升，加水稀释至1升，摇匀。4.5M硫酸溶液：取硫酸250毫升，用水稀释至1升，摇匀。咖啡碱标准溶液：称取咖啡碱（纯度不低于99%）100毫克，溶于1000毫升水中，此溶液咖啡碱浓度为100ug/ml。主要仪器紫外分光光度计分析天平。测定方法（I）─标准曲线的制作分别吸取0、1、2、5、10、12ml咖啡碱标

3、准溶液于一组100ml容量瓶中，各加入0.01M盐酸4.0ml，加水定容，混匀。用10mm石英比色皿，于波长274nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并求出回归方程。测定方法（II）茶汤制备：称取磨碎茶样3g于500ml锥形瓶内，加沸水450ml，于沸水浴中加热45min，每隔10min摇瓶一次。抽滤，并用热水洗涤2～3次，滤液移入500ml容量瓶中，冷却后加水定容。测定：准确吸取茶汤25ml于250ml容量瓶中，加0.01M盐酸溶液10ml、碱式醋酸铅2ml，加水定容，混匀，静置过滤

4、。吸取滤液50ml于100ml容量瓶中，加4.5M硫酸溶液0.2ml，加水定容，摇匀，过滤。用10mm比色皿，于波长274nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度。将所测吸光度值代入回归方程计算出茶汤中咖啡碱的浓度。结果计算测试效果此方法是我国现行标准方法，其测定值由于茶叶中其它嘌呤类化合物茶叶碱、可可碱等的影响而略偏高，但重现性好，建议每个样品做三个平行。