c小鼠外周血T细胞亚群的影响

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1、中华实验眼科杂志2014年7月第32卷第7期ChinJExpOphthalmol，July2014，Vo1．32，No．7·实验研究·鸵鸟去细胞异种角膜基质载体异位移植对BALB／c小鼠外周血T细胞亚群的影响刘先宁吴洁肖湘华潘士印银勇朱秀萍【摘要】背景鸵鸟去细胞角膜基质具有与人角膜基质相似的天然结构，有望成为直接应用或构建生物角膜理想的载体材料之一。目的用鸵鸟角膜制备去细胞基质载体，研究其免疫原性，为产业化开发早日用于临床提供实验基础。方法收集新鲜鸵鸟和猪眼球各2O个，采用低温冷冻联合酶消化及干燥剂脱水法制备鸵鸟及猪去细胞角膜基质载体，用co照射法进行消毒。按随机数字

2、表法将雄性BALB／c小鼠45只随机分为伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜基质组，伪手术组小鼠仅制作囊袋，不植入异种角膜基质片，其余两组分别取干燥脱水法制备的猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体(复水后每片湿质量为10mg)异位植入BALB／c小鼠背部皮下，术后观察伤口愈合情况，并分别于术后7、14、28d获取BALB／c小鼠外周血，进行免疫荧光标记及流式细胞仪分析，比较两种异种角膜基质对小鼠CD4、CD8、CD25表型的动态影响。结果猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体小鼠植入处皮肤无红肿及渗出，伤口愈合良好。术后7、14和28d，伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜

3、基质组外周血中CD4细胞百分率的差异均无统计学意义(F=0．74，P=0．50；F=0．39，P=0．05；F=3．46，P：0．58)．夕周血中CD8细胞百分率的差异均无统计学意义(F=1．75，P：0．21；F：1．14，P=0．35；F=0．78，P=0．48)．夕周血中CD25细胞百分率差异亦均无统计学意义(F=0．52，P=0．61；F=3．53，P=0．62；F=2．42，P=0．13)。结论鸵鸟去细胞角膜基质载体的免疫原性低，具有重要的开发价值。【关键词】鸵鸟；去细胞角膜基质；免疫原性；异位移植；T淋巴细胞；流式细胞术；近交系BALB／c小鼠Effect

4、ofostrichacellularheterOgene0uscornealstromaectopictransplantati0noilTlymphocytesubsetsinperipheralbloodofBALB／cmiceLiuXianning，Wufie，XiaoXianghua，PanShiyin，lqnYong，ZhuXiuping．OphthalmologicKeyLaboratoryofShaanxiProvince，OphthalmologicInstituteofShaanxiProvince，No．JHospitalofXi"an，EyeHo

5、spitalofXi"an，Xi"an710002，ChinaCorrespondingauthor：LiuXianning，Email：lxn65@sina．con[Abstract】BackgroundOstrichacellularcornealstromapossessesasimilarconstitutiontohumancornealstroma，SOitisexpectedtobecomeoneofidealbiologicalcornealcarriers．ObjectiveThisstudywastoinvestigatetheimmunogeni

6、cityofacellularstromacarrierofostrichcorneaandoffertheinformationforthedevelopmentofindustrializationandclinicaluseofacellularstromacarrierofostrichcornea．MethodsTwentyfreshostricheyeballsand20porcineeyeballswerecollected．Acellularcornealstromacarriersofostrichesandpigswerepreparedusing

7、lowtemperaturefreezingjointenzymedigestionmethodanddesiccantdehydrationmethodandsterilizedbycobalt一60irradiation．Thecornealstromacarrierswerepreservedusingdryinganddehydrationmethod．Forty—fivemaleBALB／cmicewererandomlydividedintotheshamoperationgroup，ostrichacellularcornealstro