新型纳米仿生骨植入材料生物相容性初步探究

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1、新型纳米仿生骨植入材料生物相容性初步探究【摘要】研究新型纳米仿生骨植入材料的生物相容性。【方法】采用骨髓基质细胞体外培养技术，通过MTT法检测细胞相对增殖度，对材料的细胞毒性进行分级评价，并采用直接接触培养法，观察细胞在材料上的黏附与散布。【结果】材料的细胞毒性分级在0〜1之间，骨髓基质细胞可紧密附着于材料表面，黏附生长，并有突起向材料的连通微孔内伸展。【结论】新型纳米仿生骨植入材料对骨髓基质细胞无毒性作用，符合医用生物材料的安全要求。【关键词】仿生复合材料骨髓基质细胞浸提液生物相容性PreliminarilyStudyofNove1BionicScaff

2、oldwithNanostructure：BiocompatibilityinVitroAbstract：【Objective】Tostudythebiocompatibi1ityofnovelbionicscaffoldwithnanostructureinvitro.【Methods】Marrowstromacells(MSC)werecu1turedwithextractingso1utionofthenovelbionicscaffold・Ce11relativegrowthrate(RGR)measuredbyMTTmethodswasuseda

3、saquantitativeassessmentforcytotoxicityofthebiomaterials・AdherencyandspreadingofMSCsonthesurfaceofspecimen,usingdirectcontactcultivation,wasobservedbySEM・【Results]Thetoxicitygradationofthenovelbionicscaffoldrdintothemicro-poresstructure・【Conclusion】Theresu1tssuggestthatthenovelbio

4、nicscaffoldhavenocytotoxicitytoMSCsandaccordwiththesecuritystandardsofmedicalbiomaterials・redthefromgrade0togradsattachedfirmlyontbiomaterferatedrapiandthenadhesurface1s,andPr0y•0bV■10used1chetretiass11promineneKeywords：bionic；composites；bonemarrowstromalcells；extract1iquid；biocom

5、patibi1ity新型生物材料的生物相容性是影响其临床应用的主要因素，材料的孔径形状、大小以及孔隙率对引导细胞的附着、侵润和生长有着重要的作用[1,2],由于本实验材料需要植入体内与骨组织紧密接触，因此材料的骨细胞相容性是本研究的主要内容。本实验采用骨髓基质细胞的体外培养技术对新研制的新型纳米仿生骨植入材料(PHBV/SGBG)进行了初步评价，为今后进一步的研究提供实验依据。1材料和方法1.1材料与仪器新型纳米仿生骨植入材料：3-轻基丁酸-co-3-務基戊酸共聚物/溶胶-凝胶生物活性玻璃［poly（3-hydroxybutyrate-co-3-hydro

6、xyvalerate）/so1ge1bioactiveg1ass,PHBV/SGBG］（华南理工大学材料学研究所提供）。主要仪器和设备：医用超净工作台、CO2培养箱、台式离心机、酶联免疫检测仪、倒置相差显微镜（中山三院中心实验室提供）；XL-30/DX-41扫描电镜/能谱分析仪（PHLIPS）（信息产业部电子五所国防科技重点实验室提供）。主要试剂和材料：DMEM培养液（Gbico）、胎牛血清（Sigma）、胰蛋白酶（PAA）、MTT（Gbico）等（购自晶美生物制品公司）。1.2实验方法1.2.1PHBV/SGBG材料的扫描电镜观察常规干燥、表面喷金，进行

7、SEM检查，直接观察材料的结构、多孔形态、孔径和孔的贯通性。1.2.2PHBV/SGBG材料的孔隙率测定采用常规称量法［3］,计算材料的孔隙率。1.2.3骨髓基质细胞的原代培养及传代采用全骨髓培养法（直接贴壁法）进行原代培养，取传代生长良好的2〜4代细胞制作细胞生长曲线。1.2.4PHBV/SGBG植入材料浸提液的制备PHBV/SGBG植入材料用环氧乙烷消毒备用，确定材料浸提液的标准浓度为培养液与材料表面积之比：10mL/cm2,将支架材料浸入完全培养液中，标准条件下(37°C,5%C02,饱和湿度)的培养箱中浸提2〜3d,吸出浸提液，无菌封存，4°C保存

8、备用。同样方法制备8倍、4倍、2倍、1倍、0・5倍、0.25倍标准