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1、核酸适体结构转换荧光法检测黄曲霉毒素B1班珺1,2,3谢岩黎基金项目：河南省科技厅科技攻关项目(162102310084)；郑州市科技局新兴产业研究计划项目(20150503)收稿日期：2018-04-02作者简介：班珺，女，1992年出生，硕士，食品安全检测技术*通信作者：谢岩黎，女，1971年出生，教授，食品营养与安全,2*(河南工业大学粮油食品学院1，郑州450052)（河南省粮油食品安全检测与控制重点实验室2，郑州450052）（广西崇左市食品药品监督管理局/崇左市食品药品检验所3，崇左532200）
2、摘要基于黄曲霉毒素B1（AflatoxinB1,AFB1）与互补链竞争结合核酸适体的位点使荧光恢复，建立了核酸适体结构转换荧光法检测AFB1。以PBS为工作液，200nmol/L核酸适体与200nmol/L猝灭链反应30min后加入AFB1孵育1h，利用荧光分光光度计检测到的荧光恢复程度对AFB1进行定量检测，可获得该方法的最佳效果。在优化条件下，AFB1检测浓度范围为1~300ng/mL，检出限为0.8ng/mL。对该检测方法的特异性进行考察，结果表明该法具有良好的特异性。对花生、玉米实际样品进行检测，回收
3、率在81.1%－108.3%之间。关键词核酸适体曲霉毒素B1荧光检测中图分类号：TS207.3文献标志码：AAnAptamerStrutureConversionFluorescenceAssayfortheDetectionofAflatoxinB1BANJun1,2,3XIEYanli1,2*(CollegeofFoodScienceandTechnology,HenanUniversityofTechnology1,Zhengzhou450052)(HenanKeyLaboratoryofCereala
4、ndOilFoodSafetyInspectionandControl2,Zhengzhou450052)(FoodandDrugAdministrationofChongzuo,Guangxi/ChongzuoInstituteforFoodandDrugControl3,Chongzuo532200)AbstractAnaptamerstrutureconversionfluorescenceassayforthedetectionofAflatoxinB1wasdevelopedbasedonAFB1c
5、ompetedwithcomplementaryoligonucleotidestobindtoaptamerthatcausefluorescencerecover.AFB1wasdetectedbyfluorescencespectrophotometerthroughthefluorescencerecoveryphenomenonasfollowcondition:PBSastheworkingbuffer,after200nmol/Laptamerreactedwith200nmol/Lquench
6、ingoligonucleotidefor30min,addingAFB1inthedetectionsystemandincubatedfor1h.Undertheoptimumconditions,thelinearrangefortheAFB1concentrationdetectionis1-300ng/mLwithadetectionlimitof0.8ng/mL.Thespecificityofthemethodwasinvestigatedandtheresultshowedthatwasgoo
7、d.Takingpeanutandcornassamplesforrecoverytest,therecoveryratewasbetween81.1%－108.3%.Keywordsaptamer,aflatoxinB1,fluorescence,detection黄曲霉毒素是由黄曲霉、特曲霉以及寄生曲霉等产生的一类含有二氢呋喃环结构的次生代谢产物[1,2]。在已分离出的20余种黄曲霉毒素中，黄曲霉毒素B1（AflatoxinB1,AFB1）致癌性最强，被认为是诱发恶性肿瘤原发性肝细胞癌(hepatocel
8、lularcarcinoma,HCC)的主要因素之一[3]。为保障食品安全及人类健康，GB2761-2017[4]对我国食品中AFB1的限量规定为：花生、玉米及其制品≤20µg/kg，稻谷、糙米、大米、植物油脂≤10µg/kg，谷物类、豆类、坚果类、酿造调味品≤5µg/kg。长期以来，科研工作者为AFB1的检测探索了许多方法，常见的传统方法有薄层色谱法[5]、高效液相色谱法[6]、液质联用法[7]、
