2012_2013年新流行猪伪狂_省略_及其gE_TK_gD基因序列分析_余秋颖.pdf

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1、中国兽医学报２０１４年１０月第３４卷第１０期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＯｃｔ．２０１４Ｖｏｌ．３４Ｎｏ．１０１５７３２０１２－２０１３年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其ｇＥ、ＴＫ、ｇＤ基因序列分析＊，明星，郑关民，张玉娟，韩莎，王川庆（河南农业大学牧医工程学院，余秋颖，常洪涛，陈文定，陈陆河南郑州４５０００２）摘要：２０１２年伊始，猪伪狂犬病（ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ，ＰＲ）在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由，对２０１２年３月至２０１３年６月间采集的疑似ＰＲ病料接种Ｖｅｒｏ细胞并经ＰＣＲ鉴定，分离到４株伪狂犬病病毒（ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ

2、ｖｉｒｕｓ，ＰＲＶ）。同时对该４株病毒的ｇＥ、ＴＫ和ｇＤ基因进行ＰＣＲ扩增、克隆、测序及分析。序列分析显示：４株ＰＲＶ河南分离株的ｇＥ、ＴＫ、ｇＤ基因有些核苷酸及氨基酸发生变化，不同于参考毒株；遗传进化分析显示：４株ＰＲＶ河南分离株形成单独１个小亚群，与中国其他地区分离株之间的亲缘关系较近，与欧洲、南美洲分离株之间的亲缘关系较远，推测此４株河南分离毒株是新型国内流行株。关键词：伪狂犬病病毒；分离鉴定；ｇＥ、ＴＫ、ｇＤ基因；序列分析中图分类号：Ｓ８５２．６５文献标志码：Ａ文章编号：１００５－４５４５（２０１４）１０－１５７３－０６Ｉｓｏｌａｔｉｏ

3、ｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓｐｒｅｖａｉｌｉｎｇｆｒｏｍ２０１２ｔｏ２０１３ａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇＥ，ＴＫ，ｇＤｇｅｎｅ＊，ＭＩＮＧＸｉｎｇ，ＺＨＥＮＧＧｕａｎ－ｍｉｎ，ＹＵＱｉｕ－ｙｉｎｇ，ＣＨＡＮＧＨｏｎｇ－ｔａｏ，ＣＨＥＮＷｅｎ－ｄｉｎｇ，ＣＨＥＮＬｕＺＨＡＮＧＹｕ－ｊｕａｎ，ＨＡＮＳｈａ，ＷＡＮＧＣｈｕａｎ－ｑｉｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａ－ｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＨｅｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈ

4、ｅｎｇｚｈｏｕ４５０００２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ（ＰＲ）ｈａｓｒｅ－ｅｍｅｒｇｅｄｗｉｔｈｄｅｖａｓｔａｔｉｎｇｉｍｐａｃｔｉｎＨｅｎａｎｓｉｎｃｅｅａｒｌｙ２０１２．Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅａｎｄａｎａｌｙｚｅｔｈｅｒｅａｓｏｎｏｆｔｈｉｓｏｕｔｂｒｅａｋ，ｆｏｕｒｓｔｒａｉｎｓｏｆｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ（ＰＲＶ）ｗａｓｉ－ｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＰＲＶｓｕｓｐｅｃｔｅｄｔｉｓｓｕｅｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓｏｆＨｅｎａｎｄｕｒｉｎｇＭａｒｃｈ２０１２ｔｏＪｕｎｅ２０１３ｔｈｒｏｕｇｈ

5、ｐａｓｓａｇｅｓｉｎＶｅｒｏｃｅｌｌ．ＴｈｅｇＥ，ＴＫａｎｄｇＤｇｅｎｅｓｏｆＰＲＶｉｓｏｌａｔｅｓ，ｗｅｒｅａｍｐｌｉｆｉｅｄｂｙｐｏｌｙ－ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ｃｌｏｎｅｄ，ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ，ａｎｄａｎａｌｙｚｅｄ．ＳｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｇＥ、ＴＫａｎｄｇＤｇｅｎｅｓｏｆｆｏｕｒＰＲＶｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍＨｅｎａｎｈａｄｓｐｅｃｉｆｉｃｃｈａｎｇｅｓｏｆｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓａｎｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｗｈｉｃｈｗｅｒｅｄｉｆｆｅｒｆｒｏｍｔｈｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅＰＲＶｓｔｒａｉｎｓ

6、；ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｆｏｕｒｓｔｒａｉｎｓｏｆＰＲＶｉｓｏｌａｔｅｓｗｅｒｅｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｏｔｈｅｒｓｔｒａｉｎｓｆｒｏｍＣｈｉｎａ，ｂｕｔｄｉｆｆｅｒｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｆｒｏｍＥｕｒｏｐｅａｎａｎｄＳｏｕｔｈＡｍｅｒｉｃａｓｔｒａｉｎｓ．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｆｏｕｒｓｔｒａｉｎｓｏｆｉｓｏ－ｌａｔｅｓｗｅｒｅｎｅｗＰＲＶｐｒｅｖａｉｌｉｎｇｓｔｒａｉｎｓｉｎＨｅｎａｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉ

7、ｒｕｓ（ＰＲＶ）；ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｇＥ－ｇｅｎｅ，ＴＫ－ｇｅｎｅ，ｇＤ－ｇｅｎｅ；ｓｅ－ｑｕｅｎｃｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓ＊Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｌｕｈａｕ＠１２６．ｃｏｍ［２］伪狂犬病病毒（ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ，ＰＲＶ）属于Ｇ＋Ｃ含量高达７３％。基因组由独特长区段疱疹病毒科α－疱疹病毒亚科，又称猪疱疹病毒Ｉ（ＵＬ）、短区段（ＵＳ）、及短区段２侧的末端重复序列［１］型。ＰＲＶ基因组为线状双链ＤＮＡ，长约１４３ｋｂ，（ＴＲ）和内部重复序列（ＩＲ）组成，基因组

8、可编［３］码７０～１００种蛋白。ｇＥ和ＴＫ基因均是ＰＲＶ的收稿日期：２０１３－１０－２９主要毒力基因和病毒增殖的非必需基因，编码的蛋基金项目：国家自然