背根包埋规程.doc

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1、背根神经节包埋操作规程一、实验用具：无水乙醇2.5L、二甲苯500ml（每个罐内装600～700ml）、石蜡（熔点56～58ºC）、塑料包埋盒、大头针、做好标签（比着包埋板格的大小裁剪纸张，用铅笔写清楚所包东西的信息）、把一次性口罩裁剪成适当大小的小方块，用来包背根神经节（防止背根神经节从包埋盒里漏出去）、纱布（剪一大块，用来包包埋盒）、绳子、配好80%、90%、95%、100%的乙醇二、实验步骤：（一）背根神经节：挑选出神经节比较大、圆的，尾比较长的，每片口罩布（单层）包2～3个，用大头针别上，在伊红中浸一

2、下。在包埋盒里放上2张标签纸，然后把别好的口罩布放入包埋盒，盖好后，头天晚上可先包好，用纱布全部包在一起，用绳子系好，泡在4%多聚甲醛中，第二天早上直接放在自来水中浸泡2h，（也可第二天过完水后放到伊红中过一下，使背根染上色，好跟石蜡区分开），然后走流程。（二）1.早上开始走流程时就把烘箱打开，把装有石蜡的蜡罐I、II放进去，使石蜡完全溶化，设温可稍高于石蜡的最大熔点(如70ºC)，待石蜡完全熔化后把温度调低至熔点范围内，等放组织时烘箱和石蜡的温度都要在石蜡熔点范围内，以免烫焦组织。2.把包埋机打开，开关在后

3、面，然后按“停止'，再按"设温"，此时蜡缸亮，设置温度（65ºC，+、-是调节温度的），按确定，蜡嘴亮，设置温度（70ºC)，按确定，保存盒亮，设置温度（65ºC），按确定，储镊块亮，设置温度（65ºC），按确定，工作台亮，设置温度（20ºC），按“确定”，然后按“运行”，即可。蜡缸----即包埋机最上面的一个槽，可随时打开查看蜡溶的状况蜡嘴----即插镊子的板前突出的头下面一个黄色的出口保存盒----即储镊块左右两边的槽，盖子向里平推即可打开，也可随时查看蜡溶状态工作台----即蜡嘴下人操作的台子（温度可设

4、低一点）DRG自来水2h80%酒精120min90%酒精50min95%酒精50min100%酒精Ⅰ40min100%酒精Ⅱ50min二甲苯Ⅰ40min二甲苯Ⅱ40min蜡Ⅰ40min蜡Ⅱ40min蜡Ⅲ20min（一）、蜡III在包埋机的保存盒里操作（温度不宜过高，65ºC即可），过完蜡II后，就把包埋盒全部倒入保存盒内，把包埋板放在玻璃板上（大头朝上，按下挡板，加蜡至格的一半，停止，放进组织，使组织位于格子中间，再加两次蜡至满，盖上相应的标签纸，正面朝外，即可），背根神经节要打开口罩布，把里面的背根神经节一

5、个个分开，挑出比较好的按上面的操作方法包埋。包埋好后，放在桌子上让其自然凝固。（一）关闭包埋机，把包埋机收拾干净，盖上罩子。（二）蜡块凝固后，使其与玻璃板分离，然后按住蜡块小头，使其从蜡格中脱离出来（若包埋板与玻璃板粘的太紧分不开，可以先放-20ºC冰箱里冻半小时或更长时间，使其脱离）（三）蜡块全部取下来后，把玻璃板和包埋板放在沸水中洗干净，擦干摆好。