Folin-Ciocaileu比色法测定不同等级天麻总酚含量.pdf

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1、囫澎摩J-：中学2014年第5期文献著录格式：熊汝琴，王锐，刘忠荣，等．Folin．Ciocaileu比色法测定不同等级天麻总酚含量[J]．浙江农业科学，2014(5)：664—665，667Folin．．Ciocaileu比色法测定不同等级天麻总酚含量熊汝琴，王锐，刘忠荣，陈顺芳(昭通学院，云南昭通657000)摘要：以没食子酸为对照，采用Folin—Ciocaileu比色法测定云南昭通产4类不同等级天麻中的总酚含量，该方法在2～12．0g·mL浓度范围内线性良好，决定系数R为0．9965，结果还表明天麻总酚含量与块茎于重

2、不呈正相关，即块茎大小与天麻的内在品质没有必然联系。关键词：天麻；Foiin—Ciocaileu比色法；总酚测定’中图分类号：S567文献标志码：B文章编号：0528-9017(2014)05-0664-02天麻(GastrodiaelataBlume)为兰科天麻属植市昭阳区，由昭通市天麻研究所提供鉴定。物，是我国名贵的药食两用中药材之一，多用于头试剂：福林酚试剂(上海喜润化学工业有限痛眩晕、肢体麻木、癫痫、抽搐等症。天麻含有丰公司)；没食子酸标准品(中国药品生物制品检定富的酚性物质，如天麻素(4一羟甲基苯．D一吡喃所，供定

3、量测定用)；NaCO(分析纯)；水为2葡萄糖苷)、对羟基苯甲醛、对羟基苯甲醇次蒸馏水。等。目前一般认为，天麻素是天麻的主要活性使用仪器：先行者电子分析天平；高速冷冻离成分，具有镇惊、抗癫痫、镇静安眠、降血压等作心机(上海安亭科学仪器厂)；UV／Vis2082PCS紫用，《中国药典》2010年版中天麻质量标准的外可见分光光度计。制定也主要以天麻素含量作为重要的参考指标。1．2方法随着药理研究的进一步深入，越来越多的报道1．2．1标准溶液配制显示，仅以天麻素作为活性指标尚不能全面反映与精确称取没食子酸标准品适量，用水溶解并定天麻

4、传统功效相关的药理活性，其他酚性成分对于容至250mL，摇匀，制成0．1432mg·mL的对其药效的发挥也非常重要¨。因此测定天麻中照品标准溶液。总酚含量，用以衡量天麻的质量可能更为合理。1．2．2标准曲线的建立云南省昭通市是我国著名的天麻地道药材产精确吸取标准溶液0．4，0．6，0．8，1．0，地，所产天麻品质优良，为当地特色经济作物。市1．2，1．4，1．6，1．8和2．0mL，分别加蒸馏水面上出售干天麻块茎，通常按块茎大小分为4个等5．0mL，混匀，加福氏试剂1．5mL，3min后，加级，1级每头I>35g，2级每头≥

5、20g，3级每头≥10％Na：CO，溶液3，0mL，用水稀释至25mL，3012g，4级≥8g。1级天麻价格为4级的3倍左右。。c水浴加热30min后，取出，摇匀，于765nm波本实验建立了天麻中总酚的测定方法，同时对昭通长下，测定吸光度值，建立标准曲线。产4种药用天麻变型(乌天麻、红天麻、黄天麻、1．2．3样品处理绿天麻)不同等级大小块茎中总酚含量进行测定，天麻中的酚性成分有脂溶性的也有水溶性的，期望为天麻的合理应用提供依据。通过预实验发现采用70％乙醇为提取溶剂，所得溶液显色后测定结果最佳。取各级干天麻块茎，粉1材料与方

6、法碎，过孔径0．149mm(100目)筛，精确称取2．01．1材料g，加70％乙醇25mL，浸泡24h，30。C水浴中超实验用乌天麻产自云南省昭通市彝良县小草坝声(工作频率40kHz，功率250W)30min，4500乡小草坝村，红天麻、黄天麻、绿天麻均产自昭通r·min离心15min，过滤，上清液置50mL容量收稿13期：2014-02—14基金项目：云南省应用基础研究计划青年项目(~012FD063)作者简介：熊汝琴(1986一)，女，助教，硕士，研究方向为天然产物化学。E-mail：xiongruqin2011@163

7、．corn。警汝琴，等：Folin—Ci。caileu比色法测定不同等级天麻总酚含量困瓶中，残渣每次加10mL70％乙醇重复前述操作再定6次，结果如表3所示，得相对标准差为提取2次，过滤，合并滤液，定容至50mL，即得0．59％，表明具有良好的重现性。总酚提取物溶液。表3重现性的实验结果1．2．4显色反应条件的确定编号吸光度值0．339实验过程中，参考相关文献，经过多次0．336实验最终确定加蒸馏水5．0mL，福氏试剂1．5mL，O．332lO％NaCO溶液3．0mL，在这样的试剂比例下，0．334O．325显色溶液的澄清度

8、和稳定性都较高。在考查反应温O．330度和时间的实验时发现，使用30。c水浴加热30min，反应条件比较温和，灵敏度高，结果可靠。2．5加标回收率取没食子酸标准品适量，制成0．1015mg·mL2结果与分析的对照品贮备液。称取2级绿天麻细末约0．5g，平行2．1标准曲线6份，精确加入对照品