抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选.pdf

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1、抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选何光志1田维毅1高英2王平1王文佳1王乾宇1黄高2安传伟11.贵阳中医学院,中国贵阳550002;2.遵义医学院附属医院,中国遵义563003目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(ScFv)库,筛选抗结核杆菌特异性、高亲和力的ScFv.方法:从结核患者的外周血淋巴细胞中,提取RNA并通过RT-PCR扩增出VH和VL基因,并采用SOE-PCR构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载pCANTAB5E中,转化于大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.结果:初级库库容

2、量为3.5×106,在大肠杆菌TG1中重组后得到2.6×106的次级抗体库.结论:成功构建噬菌体展示ScFv库并获得人源抗结核杆菌特异性ScFv,为进一步研制抗抗结核杆菌的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定了基础.结核杆菌;人源噬菌体单链抗体;制备及筛选R378.91+1A1000-2537(2011)05-0070-05ConstructionandScreeningofHumanSingle-chainAntibodyLibraryofAnti-MycobacteriumSmegmatisHEGuang-zhiTI

3、ANWei-yiGAOYingWANGPingWANGWen-jiaWANGQian-yuHUANGGaoANChuan-wei2011-04-26贵州省2011年社会发展科技攻关资助项目(黔科合SY字(2011)3020)717273@@[1]吴虢东,王玲.抗结核中药的研究进展[J].医学综述,2007,13(6):475-476.@@[2]李菁,林彤,宋帅,等.基因工程重组抗体技术的研究进展[J].生物技术通报,2009(10):40-44.@@[3]路艳,韩跃武,韩亚萍,等.抗白念珠菌人源性单链抗体库的构建及筛选[

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