黄鳝嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验-论文.pdf

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1、试验研究黄鳝嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验高明辉，严玉萍，袁昌果，唐兰，王钢★(四川省乐山师范学院生命科学学院，乐山614000)DOI：10．3969／J．1SSN．1671-6027．2014．08．017黄鳝是我国经济鱼类兼药用鱼类之一，富含丰富的10)、氧氟沙星(OFL，5)、头孢唑啉(CEZ，30)、头孢拉定(CE，DHA和卵磷脂，是构成器官细胞膜不可缺少的物质，其特有30)、利福平(RD，30)上述材料均购自杭州天和微生物试剂的“黄鳝素”有清热解毒之功效并且黄鳝还富含蛋白质和维有限公司。生素A，营养价值和药用价值极高，肉嫩味鲜深受大众青睐。1．1．4

2、试验动物清洁级昆明系小白鼠雌雄各半，共12只，近年来，黄鳝的人工养殖迅速发展，但却缺乏疾病防治的科购自乐山长征制药厂。健康的黄鳝体长和重量均相仿的20学指导，大大阻碍黄鳝养殖业的发展。其中以嗜水气单胞菌尾，购自乐山海棠公园农贸市场。引起的黄鳝出血症危害最大，一般发病率达30％，其中死亡的1．2试验方法要占70％，这给黄鳝养殖业带来了巨大的损失。我们对该病1．2．1病原菌的分离培养从乐山某黄鳝养殖场采集病体进行了细菌分离鉴定，生化试验，致病性试验及药物敏感试黄鳝，其表现特征是行动迟缓，鳝体乌青，头部红肿，鳃少量验，以期待为治疗提供技术依据。充血，腹部偶见红斑，肛门红

3、肿，重者肛门溃烂，深陷，有黄色1材料与方法黏液流出，偶尔病体黄鳝伴有羽毛状的水霉。将发病鳝体用1．1材料75％乙醇棉球反复擦洗体表，然后用灭菌剪刀打开腹腔，分1．1．1病料的采集从乐山市海棠农贸市场购买病体黄鳝。别取肝脏、消化道、血液于普通营养琼脂平板上作划线分离，1．1．2主要试剂培养基及细菌鉴定用的生化试剂等由乐在28％培养18～24h，待平板上长出菌落后，挑选单个优势菌山师范学院生命科学学院实验室提供。落再次划线分离，直到获得纯细菌为止，然后转接到营养琼1．1．3供试药片14种抗菌药药敏纸片及每片的含药量脂斜面上，置冰箱4~C保存备用。(单位：g／片)分别为

4、青霉素(P，10)、阿莫西林(AML，10)、1．2．2菌体形态观察将上述培养基上所得的菌落进行涂氨苄青霉素(AMP，10)、红霉素(E，10)、新霉素(NEO，30)、复片，革兰氏染色，镜检，观察细菌形态以及染色特征。方新诺明(SXT，25)、强力霉素(DO，30)、诺氟沙星(NOR，1．2．3生化试验将上述分离出单个培养菌落接种生化管，1O)、环丙沙星(CIP，5)、恩诺沙星(ENR，5)、培氟沙星(PEF，按常规法进行氧化酶试验、运动性测定以及分解葡萄糖、甘露醇、蔗糖、阿拉伯糖、七叶苷、鸟氨酸脱羧酶等生化试验。★通讯作者-·+一十··+·+··+”—+一··

5、+一+一+“—●一+“+-+一+“+·结果具有统计学意义(P<0．05)；☆表示与4-6个月阳性率所与猪年龄及品种具有显著相关性，本文中7—12月龄待检猪占比例对比结果具有统计学意义(P<0．05)；-k表示与7-12群猪戊型肝炎病毒阳性率高达48．98％，而小于1个月猪群个月阳性率所占比例对比结果具有统计学意义(P

6、群猪戊型肝炎病毒阳性率对比结果无显著差异(P>O．05)，但戊型肝炎(HepatitisE，HE)属于人畜共患急性病毒性肝约克夏猪群猪戊型肝炎病毒阳性率则高达100．00％，与国内炎类型，主要由戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus，HEV)通过相关研究结果相符。消化道传播疾病，普通人群戊型肝炎病死率约1％～2％，戊型综上所述，养殖者及防疫工作者应准确掌握本地区猪戊肝炎孕妇病死率则高达20％以上，严重威胁人类生活质量及型肝炎病毒流行病学特征，对年龄大于3个月、约克夏品种生命安全。近年来，随着人们自我保护意识不断加强，人猪共等戊型肝炎高危猪群作为主要防治对象，

7、采取适当药物干预患戊型肝炎频繁见诸于各类报道中，已引起广大人民及医务措施并积极改善饲养环境，降低猪戊型肝炎发生率，提高人工作者高度重视。民饮食安全性。本文研究可知，猪戊型肝炎病毒阳性率高达19．33％，且●2014年第08期试验研究致病性试验将上试验所得菌种在37培养24h后，用无表2分离菌株的药物敏感性试验结果菌生理盐水洗脱菌苔，用比浊法稀释浓度至1．0X10个／mL和5．0×10个／mL备用。1．2．3．1感染黄鳝试验将健康黄鳝分为两组，每组各10尾，水质，温度均控制相同。一组浸浴浓度为5．0×10个／mL菌液，另一组浸浴等量的清水中，养殖24～72h，记录其

8、死亡率。1