上海地区猪伪狂犬病例浅析.pdf

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1、疫病防治上海地区猪伪狂犬病例浅析刘健葛菲菲杨德全鞠厚斌王建周锦萍(上海市动物疫病预防控制中心201103)摘要：近年来上海地区猪场出现猪伪狂犬频发的现象，并导体和淋巴结。致一些猪场猪群的死亡．笔者对上海地区发生伪狂犬的病例1．2试验材料进行流行病学调查，并进行病毒分离和细菌分离，共分离伪从病死猪采集的内脏样本，BHK一21细胞(由上海市动狂犬病毒23株，细菌分离以大肠杆茵为主。初步推断上海物疫病预防控制中心诊断中心病毒室保存)。地区近年来PRV感染频发的可能原因，包括：未注射伪狂1．3试验试剂犬疫苗、购买时未进行隔离就进行

2、混群饲养及饲养环境较差猪伪狂犬荧光PCR试剂盒(购于北京生科尚仪科技有限等。初步提出防控建议：(1)养殖户应当选择大型牧场或公司，批号：201302015)、DMEM和胎牛血清(购于GIBCO者免疫措施做得比较好的猪场购买仔猪；(2)在猪群入猪公司)。棚时，应当做好棚舍的消毒工作，以及一个月的隔离饲养；1．4样本细菌分离与鉴定(3)对买回的猪群应当尽快做好主要疫病的免疫；(4)消1．4．1分离纯化灭猪场内啮齿类动物。加强抗体监测。将新鲜采集的心、肝、脾、肺和淋巴结分别接种于关键词：猪；伪狂犬病；流行病学；病例分析；调查；上

3、海Columbia培养基，置于5％的CO2培养箱(王继春，2007年)，37~C培养24h，挑取可疑菌落接种于EMB鉴别培养基，伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病病毒置于5％的CO2培养箱，37~C培养24h。(Pseudorabiesvirus，PRV)引起的多种家畜和野生动物的一1。4．2显微镜检查种急性传染病(殷震等，1997年)。伪狂犬病病毒感染猪可挑取Columbia培养基上的菌落抹片，革兰氏染色后在显以引起种猪的繁殖障碍、产弱仔，新生仔猪表现为共济失微镜下观察。调、抽搐、甚至突然死亡，育肥猪

4、主要表现为神经症状、食1．4．3生化试验欲不振、呕吐、发热等。在自然条件下猪、牛、绵羊、犬、将可疑菌落接种生化鉴定管，置于37℃5％的CO：培养猫、兔、鼠等及多种野生动物都能发生感染(孙圣福等，箱。培养48h，观察结果。2011年；黄增燕，2012年)。试验结果证实猪和鼠类是自然1．5样本病毒分离与鉴定界中病毒的主要贮存宿主．也是引起其他家畜发病的疫源动1．5．1样本处理物。猪既是本病原的原发感染宿主，又是病毒的长期贮存者取内脏样本与PBS(O．1M，pH7．2)以V，、，1：5制成匀和排毒者，在伪狂犬病的传播上起着重要作

5、用(殷震等，浆，反复冻融3次，3000r／min离心15min，取上清中加双1997年；杨小燕等，2008年)。抗，37~C感作1h，经O．221．t,m滤膜过滤除菌。本研究对上海地区近几年发生的伪狂犬病例进行病毒分1．5．2样本接种离。对分离到病毒的病例进行流行病学调查，并对近几年上将lml病毒滤液接种于长成单层的Vero细胞(王岩，海地区猪伪狂犬病例增多的原因进行分析。2007年)，盲传三代，观察细胞病变(CPE)。1材料与方法1．5．3病毒培养物的PCR鉴定1．1送检样本的处理将出现CPE的细胞培养液反复冻融三次．再

6、将细胞培养对养殖场送检的病死猪进行流行病学调查和临床剖检，液分装保存至一70℃备用，采用猪伪狂犬荧光PCR试剂盒对并采集其内脏样本，包括：心脏、肝脏、肺脏、脾脏、扁桃收获的细胞培养液进行PRV的PCR鉴定。基金项目：沪农科推字(2012)第3—2号。作者简介：刘健(1981-)，男，江苏省盐城市人，硕士，兽医师，主要从事动物病毒学研究。2014．6圈匦嗣国墨109疫病防治年)，本研究中病例也多发于12月份和2月份，夏天也偶有强养殖场的灭鼠工作(殷震，1997年)，防止因啮齿类动物发生。其中一发生伪狂犬的猪场，其饲养的犬和羊

7、也发生伪的流传导致伪狂犬传播，并对疑似病例进行隔离，加强养殖狂犬，并最终导致犬和羊的死亡(18号和19号样品)，笔者场消毒和免疫抗体监测。从死亡犬和羊的脑组织中分离到PRV病毒，确诊其死亡系由本研究采用BHK一21细胞对近几年发生PRV的病例进行PRV感染引起。其中犬是由于接触了猪流产胎儿导致发病死PRV的病毒分离，并成功分离23株PRV病毒，为今后上海亡，羊的感染原因未得到证实，可能是由于该牧场野鼠传染地区PRV的分子流行病学的研究提供有价值的毒株。对发生引起(殷震。1997年)，但是未能从该牧场捕获到野鼠，从PRV的猪

8、、犬和羊进行病原学诊断，为今后猪场建立PRV而未能证明野鼠是该猪场PRV传播的媒介，但是猪作为防控措施提供参考。对发病猪场的混合感染情况作了细菌分PRV的储存宿主(殷震，1997年)，也可能是引起羊感染离和鉴定，为牧场控制该病，降低猪群发病率和死亡率提供PRV的原因依据。对上海地区PRV频发的原因进行分