常山酮对人急性单核细胞白血病细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响.pdf

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1、JournalofChina-JapanFriendshipHospital,2014Oct,Vo1.28,No.5中Et友好医院学报2014年第28卷第5期285常山酮对人急性单核细胞白血病细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响舒峻,樊丹平,王萍,黄小杰,张岚,李鸿,郭丽丽,何小鹃(I.中日友好医院临床医学研究所,北京100029;2.中国中医科学院中医I临床基础医学研究所,北京100700)摘要目的:研究常山酮对人急性单核细胞白血病(THP一1)细胞增殖、凋亡及Bax、Bcl一2mRNA表达的影响。方法:取对数生长期的THP一1细胞,分别加

2、人不同浓度的常山酮,CCK一8法检测THP一1增殖率;流式细胞术检测THP一1凋亡情况:实时定量PCR检测Bax及Bcl一2mRNA的表达情况。结果:常山酮能抑制THP—l细胞增殖、诱导其凋亡,呈剂量依赖关系。常山酮作用后,THP一1细胞内BaxmRNA表达显著升高,而Bcl一2mRNA表达显著下降。结论:常山酮能抑制THP一1细胞增殖、诱导其凋亡,其作用机制可能与上调BaxmRNA表达、下调Bcl一2mRNA表达相关。关键词:常山酮;THP一1细胞;凋亡;Bcl一2/BaxmRNA中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1001—

3、0025(2014)05—0285—03doi:10.3969~.issn.1001-0025.2014.05.008EfectofhalofuginoneonapoptosisandexpressionofrelatedgenesofTHP一1cells//SHUJun,FANDan-ping,WANGPing,etal//JournalofChina-JapanFriendshipHospital,2014oct,28(5):285-287AbstractObjective:Toinvestigatetheeffectofhalofug

4、inoneonapoptosisandBcl一2/BaxmRNAlevelofTHP一1cells.Methods:THP一1cellswereculturedwithdifferentconcentrationofhalofuginone.cellprolifera-tionwasdetectedbyCCK一8;cellapoptosiswereexaminedbyflowcytometry;andthelevelofBcl-2/BaxmR—NAwasdetectedbyreal—timePCR.Results:Halofuginonec

5、ouldinhibitproliferationandpromoteapoptosisofTHP-1cellsinadose—dependentmanner.Aftertreatedwithhalofuginone,thelevelofBaxmRNAinTHP一1cellswassignificantlyincreased,whereasthelevelofBcl一2mRNAwasremarkablydecreased.Conclusion:Halofuginonecouldinhibitproliferationandpromoteapo

6、ptosisofTHP-1cells,whichmightpartlybethroughdown-regulatingthelevelofBcl-2mRNAandup—regulatingthelevelofBaxmRNA.Keywordshalofuginone;THP-1cells;apoptosis;Bcl一2/BaxmRNAAuthor’SaddressInstituteofClinicalMedicalScience,China-JapanFriendshipHospital,Beijing100029,Chjfla常山酮(hal

7、ofuginone,HF)是中药有效成分常山碱的衍生物,既往很长一段时间一直作为广1材料与方法谱抗球虫药使用。随着研究【ll21的深入,发现HF具1.1材料有多种生物学功能,可抑制组织纤维化;抑制THP一1细胞(购自中国医学科学院基础医学Thl7细胞分化:抑制I型胶原合成,预防瘢痕形研究所细胞中心):RPMI1640培养基、胎牛血清成等。近来,有学者报道常山酮还具有抗肿瘤作(美国Gibco公司);常山酮(美国Sigma公司);超用。本文选用人类单核细胞白血病细胞株THP一1纯RNA提取试剂盒、HiFi—MMLVcDNA第一链来探讨常山酮对其

8、增殖、凋亡及相关基因表达的合成试剂盒、RealSYBRMixture(北京康为世纪生影响,以完善相关研究。物科技有限公司);CCK一8(日本同仁化学研究所);凋亡检i贝0试剂盒(

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