金粉蕨素体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制.pdf

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1、一176一肿瘤药学2014年6月第4卷第3期Anti—tumorPharmacy,June2014,Vo1.4,No.3翻金粉蕨素体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制白军,杨春,唐敏,陈文增,陈丽(杭州市红十字会医院妇产科,浙江杭州i,310003;浙江省立同德医院急诊科,浙江杭州,310012;湖南省马王堆医院妇产科,湖南长沙,410016)摘要:目的探讨金粉蕨素(ONY)体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法体外培养人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞,采用MTT法检测ONY对人宫颈癌HeLa

2、、CaSki、SiHa、ME180细胞生长抑制率的影响;Hoechst33258染色检测ONY对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的形态学变4t5;流式细胞术(FCM)检测ONY对HeLa细胞凋亡率的影响;DNA琼脂糖电泳检测HeLa细胞凋亡的DNA条带;Westernblot分析凋亡相关蛋白表达变化。结果ONY对人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞生长有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性,以HeLa细胞对ONY最为敏感,作用24h的Ic5。值为10.48g.mL一。经ONY作用于HeLa细胞24h后,细胞出现典型的凋亡形态学

3、改变,表现出典型的凋亡特征的亚二倍体峰,且呈剂量依赖性,同时出现典型的凋亡DNA条带;同时,cvtochromec、caspase一9和caspase一3蛋白表达增加,bc卜2蛋白表达下调,而bax蛋白表达不变,Bc卜2/Bax比值下调(P<0.05)。结论ONY可能通过调控线粒体途径相关蛋白抑制宫颈癌HeLa细胞增殖并诱导其凋亡。关键词:宫颈癌;金粉蕨素;凋亡;增殖;线粒体凋亡途径中图分类号:R737.33文献标识码:A文章编号:2095-1264(2014)03—0176—06doi:10.3969~.issn.2095—1264

4、.2014.035MechanismsofOnychinInducedApoptosisinHumanCervicalCancerHeLaCelllineinvitroBA1Juni,YANGChun2,TANGMins,CHENWenzengi,CHENLil(IDepartmentofGynecologyandObstetrics,HangzhouRedCrossHospital,Hangzhou,Zhejiang,310003,China;DepartmentofEmergency,ng(zeHospitalofZhejiang

5、Province,Hangzhou,Zhejiang,310012,China;Depart—mentofGynecologyandObstetrics,MawangduiHospital,Changsha,Hunan,410016,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheefectsandmechanismsofOnychin(ONY)ontheapoptosisinhumancervicalcan—cerHeLacelllineinvitro.MethodsHumancervicalcanc

6、erlinesHeLa,CaSki,SiHa,ME180wereculturedinvitro.TheefectsofONYonthegrowthinhibitionratioofHeLa,CaSki,SiHa,ME180cellswereevaluatedbytheMTFassay.TheefectsofONYontheapoptosisofHeLacellsweredetectedthroughmorphologicalobservationbyHoechst33258staining,flowcytometricanalysis

7、(FCM),andagarosegelelectrophoresis.Theexpressionsofproteinsrelatedtoapoptosiswereanalyzedbywesternblot.ResultsONYsignificantlyinhibitedthegrowthandproliferationofhumancervicalcancercellinesHeLa,CaSki,SiHa,ME180inadose—andtime—dependentmanner.HeLacellwasthemostsensitiveo

8、neamongthefourkindsofcells,anditsIC5owas10.48gg·mL—for24h.ThecellstreatedwithONYfor24hshowedtypicalmorphologic

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