慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞及其相关细胞因子水平检测及临床意义.pdf

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1、·186·王苤查Q堡旦箜鲞箜塑』旦!!：：：：·短篇论著·慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞及其相关细胞因子水平检测及临床意义李彩东，陈锡莲，田鹏飞，李惠军，吴斌【摘要】目的探讨慢性乙型肝炎病毒感染者外周血CD4CD25调节性T细胞(Treg)、IL一18、IFN一、TGF—p水平变化及临床意义。方法选择乙型肝炎病毒携带者(ASC)112例、慢性乙型肝炎患者(CHB)63例和健康对照者5O例，采用流式细胞术和ELISA法分别检测CD4+CD25+细胞和IL一18、IFN一、TGF—B水平；采用荧光定量聚合酶链反应法检测HBVD

2、NA载量。结果CHB患者外周血CD4+CD25~Freg细胞数、IL一18、IFN一、TGF_p水平分别为(3O．97±18．78)％、(448．51±75．75)ng／ml、(190．934-38．52)nmI和(331．22±71．67)ng／ml，ASC组分别为(28．17±18．52)％、(524．52±81．42)nm1、(204．93±47．77)nI和(336．01±82．61)ng／ml，均显著高于健康人[分别为(27．30±17，59)％、(49．79±25．68)n#ml、(14．41±11．75)ng／m

3、l和(42．284-17．50)ng／ml，／9<0．053。结论乙型肝炎病毒感染者存在CD4CD25q'reg细胞数的变化，IL一18、IFN一和TGF—p可能参与了乙型肝炎患者肝损伤过程。【关键词】慢性乙型肝炎；CD4+CD25调节性T细胞；细胞因子DOI：10．39696．issn．1672-5069．2015．02．020ChangesofperipheralbloodCD4+CD25+TregceHsandIL一18、IFN—andTGF—DinpatientswithhepatitisBLiCmdong，ChenX

4、ilian，TianPengfei，et．InstituteofLiverDiseasesResearch，SecondPeople’sHospital，Lanzhou730046，GomuProvince，China【Keywords】HepatitisB；CD4CD25q"regulatorycells；Cytokines慢性乙型肝炎的发病机制复杂。国内外学者认为导致慢病学会和感染病学会联合修定的慢性乙型肝炎防治指南[51的性肝损伤的主要原因是机体免疫调控紊乱。CD4CD25调节标准。所有患者均未接受过免疫调节和抗病毒治疗

5、，6个月性T细胞(Tregulatorycells，Tregs)具有免疫抑制功能，能在内未接受过保肝治疗。排除甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染，排自身免疫性疾病、肿瘤免疫、移植免疫I-J发生发展过程中发挥除自身免疫性肝炎、酒精性肝炎、药物性肝损伤。另选择同期重要作用。Thl／Th2细胞失衡可能是HBV感染慢性化的机门诊健康体检者50例，男性25例，女性25例；年龄23～58制之一1。因此，针对慢性乙型肝炎患者Thl和Th2类细胞因岁，平均年龄(38．6-4-13．1)岁，排除各型肝炎病毒感染，排除子的研究也是慢性乙型肝炎发病机制研

6、究的热点之一。Thl心肺疾病，肝功能正常。型细胞因子主要有白细胞介素一18(Interleukin一18，IL一18)、1．2外周血CD4+CD25+调节性T细胞检测空腹取外周血2一干扰素(Interferon一1，，IFN一)等，Th2型细胞因子有转化生ml，乙二胺四乙酸二钾(EDTAK2)抗凝，在样品测定管中加人长因子p(Transforminggrowthfactor—B，TGF—p)、白细胞介抗凝血50l，加入抗CD4FITC／CD8PE／CD3PerCP单克隆抗素一10(Interleukin一10，IL—l0)等。

7、本研究旨在探讨HBV感体20l(购自美国Bectond—Dickinson公司)，振荡混匀，室染者外周血CD4+CD25q'reg及IL一18、IFN一、TGF—p水平的温避光孵育20min，加入溶血素2ml，振荡混匀，室温避光变化及临床意义。放置15min。1500r／m离心5min，弃上清液。加入PBS21资料与方法ml，1500r／m离心5min，弃上清液，重复一次。加入PBS1．1病例来源2012年7月2012年12月我院门诊和住院500LLl，上机(FACSVVerse流式细胞分析仪，美国Becton—收治的慢性乙型

8、肝炎(CHB)患者63例，男性3O例，女性33Dickinson公司)检测。全部数据用流式细胞仪和BDFAC例；年龄21～57岁，平均年龄(37．28±12．08)岁。HBV携带者Suite软件系统进行荧光参数获取和分析。(ASC)112例，男性69例，女性43例；年龄28～