叶子花花色DOD基因全长cDNA克隆与序列分析.pdf

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1、福建林学院学报2014,34(2):152—157第34卷第2期JournalofFujianCollegeofForestry2014年4月叶子花花色DOD基因全长cDNA克隆与序列分析柏忠良,佘文琴,潘东明,郭怀攀(1.福建农林大学园艺学院,福建福州350002;2.福建农林大学园艺产品采后贮藏与保鲜研究所,福建福州350002)摘要:以叶子花花苞为材料,运用RACE技术克隆出了叶子花苞片中的多巴双加氧酶基因cDNA全长,探讨叶子花花色变化机理和甜菜色素代谢途径。该序列长度为1059bp,开放阅读框位于56—802bp之间,共

2、编码249个氨基酸残基。对该氨基酸序列进行生物信息学分析,结果表明该氨基酸序列具有多巴双加氧酶保守结构域,所组成的蛋白分子量为27.94kD,等电点为5.48,是稳定蛋白。对其二级结构进行预测:该序列具有8个0【螺旋、8个B转角、20个B折叠,其序列大多是由亲水性氨基酸残基组成,不具有跨膜结构和信号肽。对该氨基酸序列进一步的Blast比对,发现组成多巴双加氧酶的氨基酸序列因植物种类而异,且亲缘关系越远,差异越大,结合花青素与甜菜色素代谢途径的不同和在自然界中不能共存的现象,表明多巴双加氧酶基因在生成甜菜色素植物中具有独特的保守性。

3、关键词:叶子花;多巴双加氧酶;甜菜色素;基因克隆中图分类号:Q781文献标识码:A文章编号:1001—389X(2014)02—0152—06Cloningandsequenceanalysisoffull-lengtheDNAoftheBougainvilleaspectabifisWilld.flowercolorDoDgeneBAIZhong—liang,,SHEWen—qing’,PANDong.ming',GU0Huai.pan,(1.CollegeofHorticulture,FuiianAgricuhureandFo

4、restryUniversity,Fuzhou,Fujian350002,China;2.InstituteofPostharvestScienceandTechnologyofHorticulturalProducts,FujianagricultureandForestryUniversity,Fuzhou,Fujian350002,China)Abstract:TheRNAofBougainvilleaspectabilisWilld.bractswereextracted,andthe4,5-DOPAdioxygenase

5、(DOD)genefull—lengtheDNAwasclonedbyRACEtechnique.ThefulllengthofthecDNAwas1059bp,openreadingflame(ORF)waslocatedbetweenthe56—802bp,whichencoding249aminoacidresidues.Accordingtobioinformatieanalyticalresultsoftheaminoacidsequence,therewas4,5-DOPAdioxygenaseconserveddom

6、aininthissequence,andthemolecularweightoftheproteincon—ponentwas27.94kD.Thep1was5.48,anditwasstableprotein.Thepredictionofthesecondarystructureshowedthattherewere8d—coils,8B—sheets,and20p—turnsinit.Mostoftheaminoacidresidueswerehydrophilic,yetnosignalpeptideandtransme

7、m—branestructurewasfound.Theblastresultsshowedthatasthedifferencesofthespeciesincreased,thesimilarityoftheDODwasdecreased.ItisindicatedthatDODgenewasquiteconservedinbetalainplantsbydiscoveringthephenomenonthatanthocyaninsmetabolismandbetalainmetabolismweredifferentand

8、couldnotcoexistinoneplant.Keywords:BougainvilleaspectabilisWilld.;4,5-DOPAdioxygenase;betalain;genecloning叶子花(Bougainvilleas

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