番鸭硬酯酰辅酶A去饱和酶1基因克隆、序列分析及填饲对其表达的影响.pdf

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1、第32卷第3期上海交通大学学报(农业科学版)V01.32No.32014年6月JOURNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY(AGRICULTURALSCIENCE)Jun.2O14文章编号:1671—9964(2014)03—0039—06DOI:10.3969/J.ISSN.1671—9964.2014.03.007番鸭硬酯酰辅酶A去饱和酶1基因克隆、序列分析及填饲对其表达的影响王健,张军,段修军,张宜辉,张蕊,董飚,龚道清(1.江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300;2.

2、扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州225009)摘要:研究旨在克隆番鸭硬酯酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)基因,并探讨该基因组织特异性表达规律以及填饲对其表达的影响。试验以番鸭为材料,采用RT-PCR方法从番鸭肝脏中扩增出SCD1基因完整CDS区域,并采用相关分子生物学软件对所获得的基因片段进行分析,同时利用实时荧光定量PCR方法检测SCD1基因在番鸭12种组织以及填饲不同阶段肝脏和脂肪组织中mRNA表达丰度。结果表明,所扩增的SCD1基因编码完整的开放阅读框,ORF长度为1083bp,共编码360个氨基

3、酸;与GenBank中禽类的氨基酸同源性在9l~97之间,与哺乳类动物同源性在8O~90之间,与鱼类同源性在68~75之间。实时荧光定量PCR结果显示SCD1基因在肝脏和腹脂中表达最高,在其他组织中少量表达或未检测到表达。填饲使得番鸭肝脏组织中SCD1基因表达极显著升高,脂肪组织中SCD1基因表达量显著升高,揭示SCD1基因可能在番鸭肥肝形成中起到重要作用。关键词:番鸭;填饲;SCD1;基因克隆;组织表达中图分类号:$834文献标识码:ACloningandAnalysisofSOD1Geneandthe

4、EffectofOverfeedingonItsmRNALevelinMuscovyDuckWANGJian,ZHANGJun,DAUANXiu-jun,ZHANGYi—hui,ZHANGRui,DONGBiao,GONGDao—qing。(1.JiangsuAgri—AnimalHusbandryVocationalCollege,Taizhou225300,China;2.CollegeofAnima1ScienceandTechnology,YangzhouUniversity,Yangzhou22

5、5009,China)Abstract:TheaimofthisstudywastocloneandanalyzethemuscovyduckSCD1gene,andrevealtheexpressionofSCD1genemRNAindifferenttissuesinmuscovyduckandtheeffectofoverfeedingonSCD1mRNAleve1.ThemuscovyduckwereusedasthesubjectstoclonethesequenceofSCD1genebyRT

6、—PCR。andthetissue-specificexpressionandtheeffectofoverfeedingonSCD1tuRNAlevelwereperformedbyreal—timePCR.Theresultsshowedthattheclonedsequencecontainedanopenreadingframe(ORF)1083bpinlengthandencoded360aminoacids.TheaminoacidhomologyofmuscovyduckSCD1were91

7、9/5~97withSCD1ofotheravianspecies,8O~90withSCD1ofmammals,68~75withSCD1offishes.Thetissue—specificexpressionresultsshowedthatthemRNAexpressionlevelof收稿日期:2013—07—01基金项目:江苏省“333工程”(苏人才E2o11~15号);江苏省“青蓝工程”(苏教师E2012139号)作者简介:王健(1974一),男,硕士,副教授,研究方向:家禽遗传育种,E—m

8、ail.tzwjian@126.com龚道清(1966一)为本文通讯作者,男,教授,博导,研究方向:家禽遗传育种,E-mail:yzgong@163.com上海交通大学学报(农业科学版)第32卷muscovyduckSCD1genewashighinliverandadiposetissues,andwasnotdetectedorlittleinother10tissuesthemRNAexpressionofmuscovy

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