丙种球蛋白的制备方案.ppt

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1、任务1丙种球蛋白分离制备方案的制定生药1111_11_第七组刘行行项目三丙种球蛋白的制备目录丙种球蛋白的基本概述丙种球蛋白的作用SephadexG-50分离制备丙种球蛋白丙种球蛋白的日常应用丙种球蛋白的临床实践丙种球蛋白预防传染性肝炎，预防麻疹等病毒性疾病感染，治疗先天性丙种球蛋白缺乏症，与抗生素合并使用，可提高对某些严重细菌性和病毒性疾病感染的疗效。预防传染性肝炎，如乙肝、甲肝等。用于麻疹、水痘、带状疱疹等病毒感染和菌感染的防治。用于哮喘、过敏性鼻炎等内源性过敏性疾病与抗生素合并使用，可提高对某些严重细菌性和病毒性疾病感

2、染的疗效。主要治疗先天性丙种球蛋白缺乏症和免疫缺陷病。SephadexG-50分离制备丙种球蛋白一、简介Sephadex是由葡聚糖通过环氧氯丙烷交联形成的三维网状凝胶颗粒。Sephadex凝胶按交联度不同，用SephadexG加一个数字来区别型号，数字越小，表示介质交联度越大，分级范围越小，反之亦然。1、实验器材层析柱（玻璃柱）、铁架台2、实验材料样品液：0.05%核黄素(VitB2)与6%丙种球蛋白等量混合置4oC保存。3、实验试剂：(1)洗脱液(pH7.2;0.1mol/L磷酸盐缓冲液）:取0.1mol/L磷酸氢二钠7

3、20ml和0.1mol/L磷酸二氢钠280ml,混匀。五、实验过程1、取直径0.8—1.2cm，长度为25cm的层析柱，在上口箍橡皮筋，出口处装上乳胶管，柱内加注蒸馏水2—3ml，排出乳胶管内的气泡，抬高乳胶管防止柱内的蒸馏水排空。自顶部缓缓加入经膨胀的葡聚糖G-50悬液。待底部凝胶沉积2—3cm时将乳胶管放低，仍继续加入上述悬液至凝胶层积至18cm高度即可。操作过程中，应防止气泡与分层现象的发生。让凝胶自然下沉，使表层平整。待凝胶柱层稳定后，以洗脱液(蒸馏水)洗柱5分钟，调节流速至4滴每分钟。2.待蒸馏水流至柱面平时，(

4、注意，不可使柱面干掉)，马上沿层析柱内壁小心加4滴样品于柱床面，注意尽量不使床面搅动，马上加入1—2倍于样晶体积的蒸馏水，反复两次后，可加大量蒸馏水连续洗脱，这样可以使样品稀释最小。3．样品一旦加入后马上用量筒或刻度离心管收集流出液，柱床上不断加蒸馏水，待红色(血红蛋白)流出一半时记录毫升数，此为血红蛋白Ve也为Vo。继续收集流出液，待黄色(核黄素)流出一半时记录体积，此为核黄素Ve。4．测出柱床体积(Vt)，外水体积(Vo)内水体积(Vi)，及核黄素的洗脱体积(Ve)。并计算出Hb及鱼精蛋的分配系数(Kd)。5．用蒸馏水

5、反复加在柱床上面，洗柱10分钟然后将柱内凝胶回收入凝胶瓶内。应用静注丙种球蛋白治疗小儿病毒性心肌炎静注丙种球蛋白治疗格林一巴利综合症静脉注射用丙种球蛋白治疗慢性结肠炎静脉注射丙种球蛋白防治早产儿高胆红素血症的临床研究静注丙种球蛋白辅治婴幼儿肺炎的临床及免疫功能观察谢谢观看