吸光光度法课件.ppt

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1、第九章吸光光度法110/7/20213:37AM9-1吸光光度法的基本原理9-2方法、仪器9-3显色反应及显色条件的选择9-4吸光度测量条件的选择9-5吸光光度法的应用习题210/7/20213:37AM9-1吸光光度法基本原理1.吸光光度法:基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立的分析方法。包括:比色法可见分光光度法紫外分光光度法一.概述310/7/20213:37AM许多物质具有颜色,而有些物质经化学反应能生成有颜色的物质或改变颜色,而且颜色深浅与浓度有关。MnO4-、Cr2O72-、[FeSCN]2+。2.特点:(1)灵敏度高:10-5~10-6mol/L。(2)准确度高

2、:相对误差:比色分析:5~10%分光光度法:2~5%,1~2%(3)应用广泛:测多数无机物和许多有机物。(4)操作简便,仪器设备易普及。410/7/20213:37AM二.物质的颜色和对光的选择性吸收完全吸收完全透过吸收黄色光光谱示意表观现象示意复合光510/7/20213:37AM物质所呈现的颜色是其吸收光的互补色。射线x射线紫外光红外光微波无线电波10-2nm10nm102nm104nm0.1cm10cm102cm105cm可见光(400~780nm)γ射线→x射线→紫外光→可见光→红外光→微波→无线电波610/7/20213:37AM1.光的性质:波粒二相性光谱光子E=hγ=h

3、c/λ单色光、复合光、光的互补单色光复合光光的互补单一波长的光由不同波长的光组合而成的光若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光,那么就称这两种单色光为互补色光,这种现象称为光的互补。蓝黄紫红绿紫黄绿绿蓝橙红蓝绿(青)710/7/20213:37AM原子吸收光谱:原子外层电子选择性吸⑴吸收光谱收某些波长电磁波,锐线光谱。分子吸收光谱:带状光谱。2.吸收光谱的产生:⑵分子内部运动:分子内部价电子运动——电子能级Ee各原子在平衡位置附近的振动——振动能级Ev分子绕其重心的转动——转动能级Er⑶分子能量:E=Ee+Ev+Er810/7/20213:37AM910/7/20213:37

4、AME电子能级ΔEe=1~20eV振动能级ΔEv=0.05~1eV转动能级ΔEt=10-4~10-2eV分子中的电子相对于核的运动:分子整体绕质心的转动:各原子在平衡位置附近的振动:分子内部运动有三种形式:1010/7/20213:37AME分子吸收能量,由基态跃迁到激发态:1~20eV对应的波长范围为1240-62nm。1110/7/20213:37AM纯电子能态间跃迁S2S1S0S3hE2E0E1E3S2S1S0hAhhh分子内电子跃迁带状光谱锐线光谱A3.吸收光谱1210/7/20213:37AM几种稠环芳烃的吸收光谱图1310/7/20213:37AM有机化合物分子

5、的电子跃迁ss*>ns*>pp*>np*1410/7/20213:37AM例:A物质B物质同理,得:(1ev=1.610-19J)4.物质对光的选择吸收:物质的电子结构不同,所能吸收光的波长也不同,这就构成了物质对光的选择性吸收。1510/7/20213:37AM测量某物质对不同波长单色光的吸收程度,以波长()为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制吸光度随波长的变化可得一曲线,此曲线即为吸收光谱。用途①进行定性分析②进行定量分析③选择吸收波长④判断干扰情况5.吸收曲线:KMnO4溶液的光吸收曲线λmax=525nm1610/7/20213:37AM定性分析与定量分析的基础根据物

6、质对光的最大吸收波长,可进行定性分析。一定的实验条件下,物质对光的吸收与物质的浓度成正比。根据物质对光的吸收多少可进行物质的定量分析。KMnO4吸收光谱λmax=525nm1710/7/20213:37AM三.光吸收的基本定律透光率(透射比)透光率定义:T取值为0.0%~100.0%全部吸收T=0.0%全部透射T=100.0%入射光I0透射光It吸光度定义:1810/7/20213:37AM透光率T与吸光度A的关系1910/7/20213:37AM∞1760年朗伯提出:c一定,一束平行的单色光通过一均匀非散射溶液后,溶液对光的吸收程度A与液层厚度b成正比。A=k1b1852年比耳提出:b

7、一定,一束平行的单色光通过一均匀非散射溶液后,溶液对光的吸收程度A与吸光物质浓度c成正比。A=k2c2010/7/20213:37AM推导推导合并上述两个定律为朗伯-比尔定律。当一束强度为I0的平行单色光垂直照射到液层厚度为b、浓度为c的溶液,通过溶液后光的强度减弱为It,则:此式即为朗伯—比尔定律的数学表达式,是光度法定量分析的基础。式中比例常数与吸光物质的性质、入射光波长及温度等因素有关。朗伯-比尔定律:2110/7/20213

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