单克隆抗体原理.docx

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1、单克隆抗体原理抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙，即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不

2、能进行无限分裂;而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代，但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性单克隆抗体制备过程杂交瘤细胞的制备1)．提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。2)．应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性3)．对杂交瘤细胞进行细胞培养，选出所需要的细胞群，并进行克隆化培养，得到稳定的杂交瘤细胞，再进行大规模培养获得单克隆抗体。单克隆抗体的

3、提纯工业发酵主要类别,乙醇发酵、食品发酵、微生物发酵 发酵工程的一般过程可分为三个步骤：第一，准备阶段；第二，发酵阶段；第三，产品的分离提取阶段。为什么说基因工程发酵工程和酶工程之间存在着交叉渗透现象？1.比如想获得某种可以治疗疾病的蛋白酶——这种酶的制备、纯化等过程就属于酶工程。2.这种蛋白酶是某生物的某基因的产物，把这个基因克隆构建到载体上——这就属于基因工程。3.把基因整合到细胞里面表达，得到这种酶——这就属于细胞工程。4.把细胞放到发酵罐中大规模生产——这就属于发酵工程。利用固定化生物催化剂的优点有很多：①

4、酶成份可以重复利用；②适合于连续操作；③产品中不会掺杂入酶；④可以更加精确地控制催化过程；⑤酶的稳定性得到改善或提高；⑥可发展成多酶反应系统；⑦减少了下水排放的问题；⑧在工业和医药业上有大的潜力等。论述蛋白质工程与基因工程的关系基因工程的发展有四代：第一代蛋白多肽基因的高效表达，也称经典基因工程；第二代蛋白编码基因的定向诱变，也称蛋白质工程；第三代代谢信息途径的修饰重构，也称途径工程；第四代基因组或染色体的转移，也称基因组工程。可见，蛋白质工程是基因工程的一部分，是基因工程发展的第二代。简述特异性免疫答应和非特异性

5、免疫答应的基本过程和特点1）无特异性，作用广泛；（2）先天具备；（3）初次与抗原接触即能发挥效应，但无记忆性；（4）可稳定遗传；（5）同一物种的正常个体间差异不大。非特异性免疫是机体的第一道免疫防线，也是特异性免疫的基础。适应性免疫应答包括细胞免疫与体液免疫，其特征是：（1）特异性，即T、B淋巴细胞仅能针对相应抗原表位发生免疫应答；（2）获得性，是指个体出生后受特定抗原刺激而获得的免疫；（3）记忆性，即再次遇到相同抗原刺激时，仍存在于体内的记忆细胞产生免疫效应，出现迅速而增强的应答；（4）可传递性，特异性免疫应答产

6、物（抗体、致敏T细胞）可直接输注使受者获得相应的特异免疫力（该过程称为被动免疫）。（5）自限性，可通过免疫调节，使免疫应答控制在适度水平或自限终止。