浅析决明子降血脂的有效成分.doc

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1、浅析决明子降血脂的有效成分【摘要】目的简要分析决明子降血脂的有效成分。方法将决明子研成粗粉,按系统溶剂提取法制取决明子正丁醇提取物。将决明子的正丁醇提取物上AB-8大孔吸附树脂,依次通过水、20%乙醇、80%乙醇洗脱,得到80%乙醇洗脱物。然后将洗脱物分别经过硅胶柱和氯仿-甲醇梯度洗脱,分段收集。然后将分段收集液经过硅胶柱层析(石油瞇一丙酮梯度洗脱)、SpehadexLH-20柱层析(甲醇一水梯度洗脱)、C??18?柱层析(甲醇一水梯度洗脱)得到六种化合物。最后通过运用低密度脂蛋白受体(LDLR)报

2、告基因模型对六种化合物的有效成分进行分析。结果化合物II能明显增强荧光素酚的活性,说明其能明显增强低密度脂蛋白的基因表达,从而有效的降低血脂含量。结论化合物11(橙黄决明索)为决明子降血脂的有效成分。?【关键词】决明子;降血脂;有效成分决明子为豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子,最早记录于《神农本草经》,现被2005年版的《屮国药典》收载。决明子归属肝、肾、大肠经,其性甘、苦、咸、微寒。中药学记载其具有清肝明目,润肠通便的功效。近年来研究证实决明子具有确切的降血脂的作用,其复方制剂在临床上已得到广泛

3、应用。但是决明子降血脂的有效成分尚不确切,这在一定程度上限制了对决明子制剂的研究和开发[1]。本研究旨在浅析决明子降血脂的有效成分,为决明子制剂的开发利用提供质量控制指标。?1资料与方法?1.1材料和仪器决明子购置于当地中药店,经鉴定为豆科植物决明的干燥成熟种子。柱层析硅胶(100^200冃、200-300冃)、薄层层析硅胶,均产自青岛海洋化工集团有限公司;AB-8大孔吸附树脂为天津南开大学化工厂生产;红外光谱仪、反相薄层板(RP18)、质谱仪、核磁共振仪均为进口设备。SwG-4显微熔点测定仪为上海

4、精密科学仪器有限公司生产(温度计未校正)o高效液相色谱仪、UV-VIS8500分光光度计为无锡科达仪器厂生产。YWG-C??14?H??37?(液相色谱固定相,10~30um)、sephadexLH-20采购自天津化学试剂二厂色谱技术开发公司。高效液相色谱用甲醇为色谱纯,其余所有试剂均为分析纯,水为重蒸馆水。?1.2方法将决明子药材研成粗粉,按系统溶剂提取法,制的决明子止丁醇提取物。将决明子的正丁醇提取物上AB-8大孔吸附树脂,依次通过水、20%乙醇、80%乙醇洗脱,得到80%乙醇洗脱物[2]。然后

5、将洗脱物分别经过硅胶柱和氯仿-甲醇梯度洗脱,分段收集,其中氯仿-甲醇(9?:?1)收集的洗脱物为组分1,氯仿-甲醇(4?:?1)收集的洗脱物为组分2,氯仿-甲醇(3?:?1)收集的洗脱物为组分30组分1经过经硅胶柱层析(石油瞇-丙酮梯度洗脱)分离得到化合物I和化合物II,组分2经过SpehadexLH-20柱层析(甲醇一水梯度洗脱)分离得到化合物III和化合物IV,组分3经过C??18?柱层析(甲醇一水梯度洗脱)分离得到化合物V和化合物VI。用薄层色谱法和高效液相色谱法对上述六种化合物进行纯度检查,

6、均未见杂质,纯度在95%以上。?2结构鉴定?分别用??13?C-NMR.??1?II-NMR、IR和MS等对上述六种化合物进行结构鉴定[3]。?化合物I经鉴定确定为确定其为钝叶素,即2,8-二拜基-1-甲氧基-3-甲基蔥醍。化合物II经鉴定,确定其为橙黄决明素,即2,6,8-三轻基-1,7-二甲氧基-3-甲基蔥醍。化合物III经鉴定确定其为钝叶决明素昔,即2-0-卩-。-葡萄糖-8-軽基-1,6,7-三甲氧基-3-甲基蔥醍。化合物IV经鉴定确定其为钝叶素背。即2-0-P-D-毗喃葡萄糖-8-疑基-1

7、-甲氧基-3-甲基蔥酿。化合物V经鉴定,确定其为大豆昔,即7-0-3-D-PH喃葡萄糖-4-耗基异黄酮。化合物VI经鉴定,确定其为cassitoroside,即2-乙酰基-3-0-P-D-咲喃芹菜糖-8-0-13-D-毗喃葡萄糖T,6-二甲氧基奈。?3有效成分筛选?对上述六种化合物进行药效学研究分析,通过运用低密度脂蛋白受体(LDLR)报告基因模型分析显示化合物II能明显增强荧光素酶的活性,随着化合物浓度的增强荧光素酶的活性也不断升高。此项结果证明化合物IT能在一定程度上明显增强低密度脂蛋白的基因表

8、达,从而调节低密度脂蛋白的代谢,降低血脂的含量。因此化合物II为决明子的有效成分。?4讨论?决明子具有广泛的药用价值,在我国资源十分丰富。据文献报道决明子的有效成分为蔥酿类、毗酮类和多糖。但对于其具体的有效成分尚缺乏研究,因而限制了决明子制剂的开发和利用。?木研究通过系统溶剂提取法提取出决明子正丁醇提取物,并经过多层分离获得了六种化合物,通过对六种化合物进行有效成分鉴定证明化合物11(橙黄决明索),即2,6,8-三轻基-1,7-二甲氧基-3-甲基蔥醜为决明子的有效成分

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