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1、!中国癌症杂志∀2007年第17卷第6期CHINAONCOLOGY2007Vo.l17No.6433乙肝病毒衣壳作为肝癌基因转移载体对肝癌是否有靶向性潘德键王东林陈正堂第三军医大学附属新桥医院全军肿瘤研究所,重庆400037[摘要]背景与目的:乙型肝炎病毒(HBV)具有嗜肝性的主要原因在于病毒衣壳(HBVE)上镶嵌的外衣壳蛋白PreS1,利用此生物特性有可能将HBVE改造成肝癌靶向性基因转移载体。本研究探讨乙型肝炎病毒衣壳作为基因转移载体对肝癌是否有靶向性。方法:采用PEG8000病毒浓缩法、丙内脂法从HepG2.2.15细胞
2、上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳(HBVE),用它包裹绿色荧光蛋白质粒(pIRS2EGFP)后得到基因转移载体复合物HBVEGFP,用HBVEGFP分别转染HepG2、A549、HeLa、FB细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,通过流式细胞仪检测细胞发光率。结果:荧光显微镜下观察可见,各组均可见绿色荧光蛋白的表达,HepG2组较之其他3组具有更高的荧光强度;流式细胞仪检测结果显示,HepG2组的转染效率为(71.350.03)%,显著高于其他3组(P<0.001),且其荧光强度是其他3组的3~4倍(P<0.001)。结论:乙型肝炎病
3、毒衣壳作为载体对肝癌具有较好的靶向性。[关键词]乙型肝炎病毒衣壳;靶向性;肝癌;基因转移;载体中图分类号:R730.5文献标识码:A文章编号:10073639(2007)06043303WhetherthehepatitisBvirusenvelopeasagenetransfervectorhastargetingabilityforlivercancerPANDejian,WANGDonglin,CHENZhengtang(CancerInstituteofPLA,TheAffiliatedXinqiaoHo
4、spital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400037,China)Correspondenceto:WANGDonglinEmail:bk333@163.com[Abstract]Backgroundandpurpose:ThereasonforhepatitisBvirus(HBV)withhepatocytespecificityisPreS1enchasedonthehepatitisBvirusenvelope(HBVE).SoHBVEmayhaveapotentialappl
5、icationinlivertargetinggenetransfer.Inthisstudy,weinvestigatedwhetherHBVEhastheabilitytotargetlivercancercells.Methods:HBVEwasobtainedfromthesupernatantofHepG2.2.15cellsthroughPEG8000systemandpropiolactonemethod.ThepIRS2EGFPwaspackedwithHBVEandresultedintheproductHBVEGFP
6、.HBVEGFPwastransfectedintoHepG2,A549,HeLaandFBcells.Thegreenfluorescentprotein(GFP)expressionwasobservedunderafluorescentmicroscope.TherateofGFPpositivecellswasdeterminedbyflowcytometer.Results:TheGFPcouldbeobservedinthefourgroups,buttheHepG2grouphadahigherfluorescentintensi
7、tythantheother3groups.ThetransfectedrateofHepG2groupwas(71.350.03)%,muchhigherthanothergroups(P<0.001)andthefluorescentintensityoftheHepG2groupwasalso34timeshigherthantheother3groups(P<0.001).Conclusions:ThehepatitisBvirusenvelope(HBVE)hasagoodtargetingabilityforlivercance
8、rcells.[Keywords]HepatitisBvirusenvelope;targeting;livercancer;g
