行业标准：DB37T 4134-2020 实验用鱼安乐死操作规范.pdf

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1、ICS07.080B50DB37山东省地方标准DB37/T4134—2020实验用鱼安乐死操作规范Operationalspecificationfortheeuthanasiaoflaboratoryfishes2020-09-25发布2020-10-25实施山东省市场监督管理局发布DB37/T4134—2020前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省海洋局提出并组织实施。本标准由山东省海洋标准化技术委员会归口。本标准起草单位：青岛华大基因研究院、青岛市标准化研究院。本标准主要起草人：黎瀚博、刘姗姗、王晨、王萌萌、郭扬、苏小珊、丁晓燕、周丽、翟越、许

2、静、赵丹。IDB37/T4134—2020实验用鱼安乐死操作规范1范围本标准规定了实验用鱼安乐死的基本要求、操作流程、档案管理及废弃物处理。本标准适用于实验环境下可养殖的实验用海水和淡水鱼类的常规生命终止操作。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1实验用鱼laboratoryfish用于科学研究、教学、检定、育种以及其他科学实验的鱼类。3.2安乐死euthanasi

3、a通过化学或物理手段人为干预，人道的终止动物生命的方法，最大限度的减少动物的惊恐或痛苦，使动物安静且平稳的死亡。3.3动物福利laboratoryanimalwelfare人类保障动物健康和快乐生存权利的理念及其提供的相应外部条件的总和。3.4鱼类颅腔fishcranialcavity由头部的皮肤、肌肉和脑颅骨围成的腔。4基本要求4.1安乐死基本原则实验用鱼安乐死应按照动物保护及动物福利的相关国际及国家规范中的相关要求和原则执行。旨在针对有终止生命必要性的实验用鱼，减少其不必要的应激、痛苦和伤害，采取痛苦最少的处置方法。1DB37/T4134—20204.2人员要求实验人员应了解

4、实验用鱼的生理结构，熟悉鱼类生理相关实验，主要操作人员应经过专业的鱼类生理学培训。4.3防护措施实验人员需佩戴一次性乳胶手套、口罩、头套，穿着实验服进行操作。5操作流程5.1准备工作5.1.1操作环境实验用鱼安乐死操作环境应满足如下条件：a)实验场所应远离自然疫源地，易于清洁，相对封闭，可满足处理及暂存动物尸体、废水及其废弃物的需求；b)实验环境温度范围应保持在在16℃～26℃，以保证水温不会急剧变化；c)实验环境应保持洁净卫生，空气洁净级别在Class6以上；d)湿度应保持在40%～70%；e)保证光照不低于200lx。5.1.2实验用具准备实验用鱼安乐死操作应准备以下耗材：a

5、)灭菌手术器具（包括眼科剪、解剖针、解剖镊）；b)解剖盘；c)麻醉盒；d)手套、口罩、头套及实验服。5.1.3试剂准备5.1.3.1实验用鱼安乐死操作应准备以下试剂：a)间氨基苯甲酸乙酯（以下简写为MS-222）粉末：MS-222粉末避光保存，使用前检查是否有结块、变色现象，不可使用结块或变色的MS-222；b)实验用水：清洁的实验用鱼的养殖用水，包括清洁淡水或合适盐度的清洁海水。5.1.3.2麻醉剂配制：a)母液配制：取2gMS-222粉末，溶于1L实验用水中，配制过程中，适当搅拌溶解，得到2000mg/L的麻醉剂母液。母液应于4℃条件避光贮存，一般情况下，有效期为2周；b)麻

6、醉剂配制：按照麻醉液的终浓度，取适量母液加入适量实验用水搅拌混匀，保证麻醉剂的最终体积是待麻醉用鱼体积的3倍以上。示例：配制4L浓度为50mg/L的麻醉液时，取100mL母液加入3.9L实验用水；配制4L浓度为100mg/L的麻醉液时，取200mL母液加入3.8L实验用水；配制4L浓度为350mg/L的麻醉液时，取700mL母液加入3.3L实验用水。5.2麻醉致死5.2.1麻醉剂浓度选择2DB37/T4134—2020麻醉时根据实验用鱼的体重，选择麻醉剂浓度，详见表1。针对初次麻醉浓度无效的部分耐受性较强个体，直接使用350mg/L麻醉浓度进行麻醉。表1不同体重鱼类麻醉浓度参考表

7、麻醉液浓度鱼类体重麻醉时长mg/Lkgmin50≤0.110～251000.1～0.510～25200≥0.510～25350耐受性较强个体20～305.2.2麻醉流程5.2.2.1将实验用鱼完全浸入配制好的3倍体积的麻醉溶液中，麻醉20min。5.2.2.2观察鱼类的状态，实验用鱼会依次出现以下状态：a)体型对称鱼类身体失去平衡，游动姿态有较大变化，如：侧游、抽搐等，体型非对称鱼类挣扎过后静止不动；b)实验用鱼彻底失去活动能力，且鳃部呼吸动作在肉眼观察下不明显。5.2.3麻醉致