最新实验六 体外抑菌实验教学讲义PPT课件.ppt

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1、实验六体外抑菌实验实验内容实验一影响药物作用的因素实验二药物代谢动力学实验实验三处方与药物的配伍禁忌实验四中毒与解救试验实验五药物对离体肠的影响实验六抗微生物药物的体外抑菌实验实验七生物碱的提取及其药敏实验实验八药物对离体心脏的影响实验六、抗菌药物的体外抑菌实验【实验目的】掌握药敏试验的方法，了解药物对常见菌的作用。意义：体外抗菌试验对临床用药具有参考价值。鉴定新药是否具有抗菌活性。下一张主页退出上一张【实验步骤】一、纸片法以灭菌小棉签取金黄色葡萄球菌液（每ml约含3亿个细菌），注意不宜蘸取过多，以刚浸湿整个棉签为度，轻轻地从四个不同方向平行交叉划线，使菌液均匀涂布于整个琼脂平板上。同

2、样方法，也可制作大肠杆菌平板备用。下一张主页退出上一张二、纸片法取已经制备好的4种药敏片：青霉素16万u/ml、链霉素10万u/ml、10%磺氨嘧啶钠、四环素0.05g/ml，放置在已接种细菌的琼脂平板表面的不同区域。为了位置间隔准确，最好事先在平皿底用蜡笔作上记号。将培养皿置37℃培养24h，观察纸片周围有无抑菌环，并测量抑菌圈的直径，比较各药的抗菌效力。样例如下图：下一张主页退出上一张下一张主页退出上一张下一张主页退出上一张细菌青霉素（16万u/ml）链霉素（1.0万u/ml）磺氨嘧啶钠(1%)四环素(25%)金葡菌链球菌大肠杆菌实验结果记录：抑菌直径（mm）下一张主页退出上一张

3、药物沙门氏杆菌二、试管二倍稀释法取灭菌小试管10支，按照1至10编号，排列于试管架上。按照无菌操作，从第一管到第10管，分别加入牛肉膏汤1ml。用吸管吸取256μ/ml的青霉素溶液1ml放入第一管，并反复吹匀；接着从第一管吸出1ml放入第二管同样吹匀后吸出1ml放入第三管，依次逐管进行稀释到第８管，第10管不加青霉素液，作细菌对照组，第９管只加药物，不加菌液，作为药物对照组。下一张主页退出上一张0.500.50.50.50.50.50.50.50.5葡萄球菌液（ml）0弃111111111青霉素（ml）1111111111牛肉膏汤（ml）10987654321试管号下一张主页退出上一张

4、1-8，10各加入培养18h并用牛肉膏汤稀释至5×107～108cfu/ml的金黄色葡萄球菌菌液0.5ml。放入37℃培养箱内培养24h后，取出观察细菌生长情况。以能抑制细菌生长的最小浓度为青霉素对该细菌的最低抑制浓度（MIC）。最低杀菌浓度（MBC）结果记录于下表：下一张主页退出上一张管号12345678910稀释倍数11/21/41/81/161/321/641/1281/2560稀释浓度(u/ml)12864321684210.5－金色葡萄球菌记录实验结果下一张主页退出上一张【注意事项】1.接种细菌时要在无菌条件下均匀涂抹；用过的棉签火焰烧灼后丢弃。2.用试管二倍稀释法测MIC值

5、，稀释时注意稀释的顺序；每次移液前注意清洗吸管。3.药敏片之间要间隔适当距离，以免抑菌圈出现交叉。4.四人一组，纸片法每人一个平皿，作四种药物对一种菌的作用，同组每人所接菌种不同，平皿上做好记号。结果记录时将本组结果综合。下一张主页退出上一张【思考题】分别以抑菌圈的大小和MIC值来比较常见药物对金黄色葡萄球菌的作用强度。下一张主页退出上一张Careful,thensuccessful!任务型驱动作文“任务驱动型作文”的提法，来源于教育部考试中心张开老师的一篇文章《注重题型设计、强化教育功能——2015年高考作文的特点及相关问题的解读》，在文章里，作者通过分析2015年高考作文尤其是新课

6、标卷作文的命题特点，正式提出在材料作文的基础上增加任务驱动指令的概念：“在材料引发考生思考、激发写作欲望的基础上，通过增加任务型指令，着力发挥试题引导写作的功能，增强写作的针对性，使考生在真实的情境中辨析关键概念，在多维度的比较中说理论证。其特点是可写性，选择性，导向性，探究性，防套性。难易度。应当引起重视，留心生活社会热点，勤加练习，注意新型文章结构和构思方法，做到随机应变。”加强作文训练，突破重难点。应重点---加强审题训练，立意要力求深刻，见解要力求新颖；要积累新鲜素材，运用要灵活；语言要讲求修辞，凸显文采；还应强调文章的合理布局，注意细节，如段落字数、书写标点等。深刻性是高考新

7、材料作文评价的一个重要尺度，思辨性是高考驱动作文的一个重要表征。多看点评论文章借鉴他山之石，多关注社会时事磨炼思维深度，多师生交流切磋相互碰撞观点，多掌握议论方法定点打磨训练。第一步：概述材料，亮出观点。(展示现象）第二步：辩证说理，纵说横述。(挖掘本质，探求原因）第三步：面对生活，阐述方案。(寻找方法）第四步：小结归纳，再次扣题。(收束文章）忌：笼统绝对平面倡：具体 辩证 立体自己欣赏自己写的文章就是好文章。言之有物；言之有理；言之有据；言之