实验四 放线菌、酵

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1、实验四放线菌、酵母菌和霉菌形态观察1.1了解放线菌、酵母菌、霉菌的培养方法。1.2掌握放线菌、酵母菌、霉菌的制片技术和染色方法。1.3掌握观察放线菌、酵母菌、霉菌的形态特征的方法。1实验目的2.1放线菌、霉菌和酵母菌在形态特征和生殖方式上有什么异同?2.2如何鉴别酵母菌细胞的活性?2.3用乳酸石碳酸棉兰染色液对霉菌制片有哪些优点?2实验原理(通过了解下列问题来掌握实验原理)孢子囊孢子囊梗3材料与方法3.1实验器材3.1.1药品:酵母菌染色液:吕氏碱性美蓝染液。霉菌染色液:乳酸石碳酸棉兰染色液3.1.2菌种:S

2、treptomycessp.(链霉菌),Saccharomycescerevisiae(酿酒酵母),Penicillumcitrinum(桔青霉),Rhizopusoryzae(米根霉),Aspergillusniger(黑曲霉)。3.1.3仪器:显微镜(MODELE100)3.1.4其它物品:酒精灯,载玻片,盖玻片,擦镜纸,接种环,镊子、大头针等。3.2方法3.2.1.1插片法培养放线菌。按无菌操作要求,取链霉菌培养物在高氏一号培养基上密集划线接种。用镊子取无菌载片以45。角插入培养基平板上。将平板倒置,于

3、28℃培养3-5天。3.2.1放线菌制片与观察。3.2.1.2制片、镜检、绘图。用镊子取长有培养物的盖玻片,用擦镜纸擦去背面培养物,将有菌面朝上放在载片上。先用低倍镜观察基内菌丝、气生菌丝、孢子丝和孢子的位置,接着换高倍镜观察各部位的细微结构,绘图并说明各部位的名称。3.2.2酵母菌制片与观察。3.2.2.1酵母菌培养。在麦芽法培养基平板上划线接种酿酒酵母,于28℃培养1-2天。3.2.2.1美兰染液水浸片法制片。滴一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液于载片中央,用接种环按无菌操作取菌落边缘培养物少许置于染液中,混合

4、均匀。或取啤酒培养物少许滴加在染液中。加盖片。3.2.2.2镜检及绘图。将制片放置3min后,分别用低倍镜和高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况,并区分死、活细胞。染色30min后,比较死、活细胞的比例。绘图注意标明各部分结构。(细胞质部分以细点表示)3.2.3霉菌制片与观察。3.2.3.1霉菌培养。按无菌操作方式将霉菌点接于在PDA培养基平板上,于28℃培养3-5天。3.2.2.2直接制片观察法。滴一滴乳酸石碳酸棉兰染液于载片上,用镊子取霉菌培养物少许,先于50%乙醇中浸一下先去脱落的孢子,然后将培养物置于染液

5、中,用大头针小心将菌丝分开。加盖片。3.2.3.1霉菌观察。先用低倍镜观察菌体的各个部位,认识霉菌各部分结构,必要时用高倍镜观察,尤其注意观察产孢子结构。绘图并标明各部分名称。实验报告1用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法.实验结果。按绘画要求进行。3实验分析。分析制片、观察过程中存在的问题,如何改进?

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