高效液相色谱和气相色谱的异同点

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1、--高效液相色谱和气相色谱的异同点不同点：一、流动相不同：HPLC为液体流动相，GC为永久性气体作流动相〔通常叫做载气〕二、进样器不同：高效液相为平头进样针，气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同：〔1〕气相色谱柱通常几米到几十米〔气相色谱由于载气的相对分析量较低，分子间隙大，故粘度低，流动性好，组分在气相中流动速度快，因此可以增加柱长，以提高柱效〕。〔2〕液相色谱柱通常为几十到几百毫米四、分析种类有差异：气相色谱分析的对象多为〔不适绝对〕：分子质量小于1000，低沸点，易挥发，热稳定性好的化合物。液相色谱：更适用于分析高沸点，难挥发，热稳定性差，分子质量较大〔10

2、00--.word.zl----2000〕的液体化合物。五：样品柱前变化不同：气相色谱的样品在柱前必须变为气体〔气化室汽化〕，而液相色谱的样品在柱前那么无变化。六、所用检测器有差异：液相主要为：紫外检测器，荧光检测器、示差折光检测器.....气相色谱主要为：氢火焰离子化检测器〔FID〕,热导检测器〔TCD〕,电子捕获检测器〔ECD〕,火焰光度检测器〔FPD〕,氮磷检测器〔NPD〕.....一样点：根本原理一样。都是利用物质在流动相和固定相中的分配系数的差异，从而在两相间反复屡次〔1次，甚至更多〕的分配，使原来分配系数差异很小的各组分别离开来。vOwen发现异卵双生

3、牛的天然免疫耐受现象(1945)，明确自身识别问题，伯耐特(Burnet，1949)提出免疫耐受理论，梅德华(Medawar，1953)实验证实胚胎期耐受理论。耶那(Jerne，1955)提出天然抗体选择学说，完成免疫网络学说(1974)，伯耐特等(Burnet&Talmage,1957)完善克隆选择学说等免疫防御(immunologic抗感染defense)免疫稳定(immunologic消除炎症或衰老细胞homeostasis)免疫监视(immunologic控制癌变细胞surveilance)-.word.zl---1．高压：液相色谱法以液体为流动相〔称为载

4、液〕，液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～3.5万KPa。　　2.高速：流动相在柱的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h。　　3.高效：近来研究出许多新型固定相，使别离效率大大提高。　　4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升。-.word.zl---　　5.适应围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比拟：气相色谱法虽具有别离能力好，

5、灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进展分析。而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大〔大于400以上〕的有机物〔这些物质几乎占有机物总数的75%～80%〕原那么上都可应用高效液相色谱法来进展别离、分析。据统计，在化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。-.word.zl---　　高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换

6、液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱别离或分析各种化合物的原理根本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好，且须在色谱仪中进展。编辑本段主要类型及其别离原理　　根据别离机制的不同，高效液相色谱法可分为下述几种主要类型：　　1．液—液分配色谱法(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化学键合相色谱(ChemicallyBondedPhaseChromatography)-.word.zl---　　流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

7、应互不相溶〔极性不同，防止固定液流失〕，有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进展分配。到达平衡时，服从于下式：　　式中，cs—溶质在固定相中浓度；cm--溶质在流动相中的浓度；Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处，即别离的顺序取决于K，K大的组分保存值大；但也有不同之处，GPC中，流动相对K影响不大，LLPC流动相对K影响较大。　　a.正相液—液分配色谱法(NormalPhaseliquidChromatography):流动相的极性小于固定液的极性。-.word.zl---　　b.反相液—液分配色谱法(ReverseP

8、hasel